Отправлено: 19.03.07 15:13. Заголовок: Дирофиляриоз

Рассказывайте все, кто что знает!(((
Проблема: у щенка 8 мес. нашли в крови микрофилярий. Случайно. Диагноз был - пневмония, сделали рентген, обнаружили, что сердце несколько увеличено. Анализ неутешительный - дирофиляриоз. Есть вопросы:
1. Может ли заболевание передаваться внутриутробным заражением?
2. Каковы прогнозы?
3. Кроме мазка, как еще можно диагностировать - УЗИ сердца?
4. Какова вероятность того, что болеет весь помет?
5. Чем лечить?
6. Профилактика?
7. Ареал распространения заболевания?
8. Вероятность заражения человека?
Выкладывайте все, что знаете, а то у меня мнительность развивается, чувствую, как в сердце червяки копошатся!(((((

 Отправлено: 20.03.07 13:33. Заголовок: Re:

Дирофиляриоз
(материалы монографии: Архипов И.А., Архипова Д.Р. Дирофиляриоз. - М., 2004)

Тираж этой монографии всего 150 экземпляров. Учитывая актуальность темы, начинаем публикацию материалов с сокращениями.

В монографии представлен анализ результатов собственных исследований и литературных данных, касающихся изучения биологии и сроков развития дирофилярий в организме дефинитивного и промежуточного хозяев, распространения дирофиляриоза собак городской и сельской популяций, видового состава, численности комаров и их зараженности личинками дирофилярий. Приводится фактический экспериментальный материал и дается сравнительный анализ данных по эпизоотологии, диагностике, терапии и профилактике этого заболевания. Рассматриваются вопросы влияния возраста, пола, породы, типа содержания собак на зараженность их дирофиляриями, влияния D.immitis и D.repens на клинические, гематологические и биохимические показатели животных. Описаны сезонная и суточная периодичность микрофиляриемии, методы прижизненной диагностики дирофиляриоза собак, в том числе, количественный метод подсчета микрофилярий в крови, а также оптимальные схемы профилактики дирофиляриоза собак.

Введение
Дирофиляриоз собак вызывается нематодами Dirofilaria immitis, паразитирующими в правом желудочке сердца и легочной артерии и D.repens, локализующимися в подкожной клетчатке.

Дирофиляриоз сердца и подкожной клетчатки широко распространен во многих странах мира, в том числе, в Российской Федерации и в странах Ближнего Зарубежья.

В последние годы отмечена тенденция к широкому распространению этого заболевания и расширению ареала его распространения не только на юге, но и в средней полосе России.

Основными причинами распространения дирофиляриоза являются неограниченные перемещения животных из одного региона в другой, плохо обустроенные оросительные каналы, создающие условия для массового выплода комаров - промежуточных хозяев дирофилярий, ввоз заболевания из других стран, ограничение использования химических средств защиты от гнуса, а также недостаточный арсенал антгельминтиков против взрослых дирофилярий.

Паразитируя в сердце, D.immitis вызывают расстройство кровообращения в результате механической закупорки и прогрессирующего эндоартериита. Заболевание приводит к эмболии, тромбозу кровеносных сосудов, а в дальнейшем циррозу печени, асциту и гибели собак.

При заражении собак D.repens у них появляются поражения кожи в области головы и конечностей в виде папулезного дерматита и множественных узелков с изъязвлениями.

Дирофиляриоз представляет большую опасность для человека. В России и в странах СНГ известно свыше 300 случаев поражения человека D.repens. При этом у людей отмечали серьезную патологию в форме подкожных или субконъюнктивальных узелков, отечности и поражения глаз.

В предыдущие годы дирофиляриозу собак было посвящено большое количество работ, как иностранных, так и отечественных исследователей, в которых сообщались сведения, касающиеся, в основном, распространения дирофиляриоза в том или ином регионе. Однако до сих пор в литературе недостаточно освещена биология развития D.immitis и D.repens в организме дефинитивного и промежуточного хозяев, эпизоотология заболевания собак в условиях нашей страны, влияние дирофилярий на организм собак, диагностика, терапия и профилактика дирофиляриоза.

Учитывая вышесказанное, авторами проведен анализ литературы и представлены результаты собственных исследований по проблеме дирофиляриоза.

Установлено широкое распространение дирофиляриоза и высокая плотность популяции D.repens в организме собак городской и сельской популяций. Максимальная инвазированность собак D.repens установлена в возрасте 4-6 лет. Выяснено влияние пола, породы, условий содержания на зараженность собак дирофиляриями. Уточнены сроки развития D.immitis и D.repens в организме собак и комаров в условиях нашей страны. Установлена диапауза в микрофиляриемии при дирофиляриозе в дневное и зимнее время и разработан количественный метод прижизненной диагностики дирофиляриоза с использованием счетной камеры и препарата для провокации микрофиляриемии. Оценена активность и персистентность микрофилярицидного действия некоторых препаратов из группы макроциклических лактонов.

Разработана научно-обоснованная оптимальная схема профилактики дирофиляриоза собак. Рекомендации по профилактике дирофиляриоза собак одобрены на секции "Инвазионные болезни животных" Российской академии сельскохозяйственных наук (2003 г.).

Систематика
Дирофиляриозы плотоядных вызываются нематодами. Род Dirofilaria насчитывает 26 видов. На территории России и стран ближнего Зарубежья у собак паразитируют 2 вида дирофилярий: D.immitis и D.repens, поэтому дальнейшие исследования проведены авторами в отношении этих двух видов.

D.immitis паразитируют у собак, волков, лисиц, кошек, тигров, ягуаров, медведей, выдр, ондатры, морских львов, обезьян и человека.

Хозяевами D.repens являются собаки, волки, кошки, леопарды и человек.

Морфология возбудителей дирофиляриоза
Dirofilaria immitis - это длинные нематоды светло-желтого цвета, слегка суживающиеся к концам (А.М.Петров, 1941), паразитирующие в сердце и легочных артериях. Длина тела самцов 120-180, максимальная ширина - 1,124-1,286 мм. Длина тела самки D.immitis 250-300, максимальная ширина 0,75-1,514 мм.

Dirofilaria repens - нематоды, паразитирующие в подкожной клетчатке собак, кошек, лисиц, волков, енотовидных собак и т.д. Длина тела самца D.repens 51, ширина 0,32 мм. Длина тела самки 106, максимальная ширина 0,53 мм. В 1937г. были описаны D. repens, длина которых равнялась 140-150, а ширина 0,447-0,552 мм.


Развитие дирофилярий в организме собак
Развитие D.immitis
Цикл развития D.immitis впервые описан в 1900г. В 1955г. воспроизведен цикл развития D.immitis путем экспериментального заражения собак инвазионными личинками, выделенными от экспериментально инвазированных комаров. Препатентный период развития D.immitis в организме экспериментально инвазированных собак составил 32 недели. Продолжительность жизни D.immitis в организме собак более 2-х лет.

В другм исследовании собак заражали путем подкожных инъекций инвазионных личинок дирофилярий, выделенных из экспериментально инвазированных комаров. Было установлено, что миграция личинок в сердце происходит на 85-120-й дни после заражения. Однако, некоторое количество личинок находили в сердце, начиная с 67-го дня, т.е. наличие личинок возможно в сердце и других тканях между 67 и 120-м днями после заражения.

Несколько отличаются данные 1961 г. - развитие личиночных стадий D.immitis в организме собак при экспериментальном заражении. Установлено, что инвазионная личинка линяет и превращается в личинку четвертой стадии через 9-12 дней после заражения собак. Четвертая линька происходит на 60-70-й дни. Личинок 3-й стадии уже можно дифференцировать по полу. После последней линьки молодые дирофилярии мигрируют в правое предсердие, где происходит длительный процесс созревания. К 191-му дню заражения в крови можно обнаружить микрофилярий. Личинок находили в подкожной ткани собак через 68 дней после заражения. Начиная с 90-го дня после заражения личинок обнаруживали только в сердце.

В последующие годы проводились и другие исследования.

Авторами данной монографии впервые в условиях России изучено развитие D.immitis в организме собак в лаборатории экспериментальной терапии Всероссийского института гельминтологии им. К.И.Скрябина (И.А.Архипов, 1986; Д.Р.Архипова, 2003). Для экспериментального воспроизведения цикла развития D.immitis в лаборатории содержали собаку по кличке Альфа, спонтанно инвазированную и доставленную из Узбекистана. Культуру комаров Aedes aegypti, являющихся промежуточными хозяевами дирофилярии, содержали в специально оборудованном инсектарии при температуре 22-25 С и относительной влажности 60-80%. Комаров заражали путем естественного их питания на инвазированной собаке.

Цикл развития D.immitis

Инвазионных личинок собирали однограммовым шприцом с иглой, подсчитывали и суспензию с физраствором вводили подкожно 5 другим собакам в дозе 20 личинок на животное. Еженедельно, начиная со 170-го дня после заражения, у собак исследовали пробы крови количественным методом, разработанным нами, для выявления микрофилярий и установления срока развития D.immitis в организме собак.

При заражении собак D.immitis в дозе 20 инвазионных личинок на голову микрофилярий в крови начали обнаруживать у одной собаки спустя 30 недель после заражения, у другой - на 31 и у остальных - на 33-36-й неделях опыта. В начале микрофилярий обнаруживали в незначительном количестве и только спустя 3-5 недель находили максимальное количество микрофилярий. Средняя продолжительность препатентного периода D.immitis в организме собак составила 33,6+1,3 недель (235 дней). В 20 мм3 крови собак обнаруживали от 45 до 214 экз. микрофилярий, а в среднем, 117,0+12,4 экз.
Таким образом, в условиях нашей страны продолжительность препатентной стадии развития D.immitis в организме собак составила 33,6 недели.


Развитие D.repens
В 1955г. Был воспроизведен цикл развития D.repens путем экспериментального заражения собак инвазионными личинками, выделенными от экспериментально инвазированных комаров. Цикл развития D.repens аналогичен D.immitis, но взрослые дирофилярии вида D.repens локализуются в подкожной клетчатке. Препатентный период развития D.repens в организме экспериментально инвазированных собак составил 26 недель, что значительно короче периода развития D.immitis. Продолжительность жизни D.repens в организме собак может быть от 17 мес. до 3 лет.

Продолжительность жизни микрофилярий D.repens и D.immitis изучали путем трансплантации микрофилярий в кровь не зараженных животных (1912; 1939). Установлена продолжительность жизни микрофилярий, равная 2-2,5 года. По данным 1968г. микрофиляриемия может наблюдаться в течение 7,5 лет после заражения. Некоторые исследователи (1990г.) считают, что микрофилярии живут в крови только 6 месяцев.
Развитие D.repens в организме собак изучали аналогично как и D.immitis (Д.Р.Архипова, 2003). Для этого использовали собаку по кличке Марта, которая была инвазирована D.repens. В качестве промежуточных хозяев использовали комаров, которых заражали также путем их питания на инвазированной собаке. После достижения инвазионной стадии комаров вскрывали и собранных личинок в физрастворе вводили 8 другим собакам в дозе 20 инвазионных личинок на животное. Еженедельно, начиная со 150-го дня после заражения, у собак исследовали пробы крови для выявления микрофилярий и определения срока развития D.repens в организме собак.

В условиях Республики Калмыкия по данным авторов распространен дирофиляриоз, вызванный D.repens. После экспериментального заражения собак D.repens микрофилярий в крови впервые начали обнаруживать в незначительном количестве через 25 и последующие недели после заражения. Интервал от момента заражения до обнаружения микрофилярий в периферической крови собак составил, в среднем, 27,0 недель, т.е. 193 дня.

Следует отметить, что срок препатентного развития D.repens в организме собак на 6 недель короче, чем D.immitis.

Таким образом, впервые в условиях нашей страны установлена продолжительность препатентной стадии развития D.repens, равная 193 дням.

Развитие дирофилярий в организме промежуточного хозяина
Сроки развития инвазионных личинок D.immitis
Цикл развития D.immitis впервые описан в 1900 г.

В 1954г. было установлено, что развитие личинок дирофилярий возможно и в организме блох Ctenocephalides felis, C.canis, Xenopsylla cheopis, Pulex irritans, Echidnophaga gallinacea, Orchopeas wickhami.
В настоящее время известно, что промежуточными хозяевами дирофилярий могут служить комары родов Culex, Aedes, Anopheles, Mansonia.

При кровососании комаров на инвазированном животном личинки дирофилярий попадают в тело комара, где мигрируют в мальпигиевы сосуды. При сильной зараженности комаров микрофиляриями процент выживаемости их значительно снижается, что является сдерживающим фактором в передаче дирофиляриозной инвазии.

В 1960г. Было проведено экспериментальное заражение комаров Aedes aegypti D.immitis в лабораторных условиях и установлено, что развитие до инвазионной стадии длится 15-17 дней при температуре 26°С и 80%-ной влажности.

Микрофилярий развиваются до инвазионной стадии в организме комаров при температуре 27,8°С в течение 10 дней, при температуре 17,8°С срок развития увеличивается до 48 дней (1977).

По данным 1981г. развитие личинок D.immitis в организме промежуточного хозяина зависит от переносимости температуры комарами. В мальпигиевых сосудах комара за 10-14 дней происходит 2 линьки и личинка превращается в инвазионную (1997). Личинки третьей стадии мигрируют в просвет губ комара и способны заражать другое животное при кровососании на нем. По данным 2000г. для нормального развития личинок необходима температура выше 27°С в течение 2 недель. При температуре ниже 14°С развития не происходит.

Существует несколько факторов, влияющих на передачу инвазии от комара к животному: возраст комара, степень его зараженности микрофиляриями, сезон года (2001). Передачи инвазии не происходит в зимние месяцы - декабре, январе, феврале и марте.

Сроки развития инвазионных личинок D.immitis в организме комаров изучены авторами (И.А.Архипов, 1986; Д.Р.Архипова, 2003) в лабораторных условиях. Комаров заражали путем естественного их питания на собаке, инвазированной D.immitis, содержали в марлевых садках и ежедневно через 10 дней после заражения вскрывали по 30 насекомых (отдельно голову, грудь, брюшко и мальпигиевы сосуды) для определения сроков развития инвазионных личинок по методу T.C.Orihel (1961).

Развитие инвазионных личинок D.immitis в организме комаров Ae.aegypti происходило в течение 10 дней. Однако максимальное количество инвазионных личинок в головной части комаров отмечали на 15-й день после их экспериментального заражения на собаке, инвазированной D.immitis.

Сроки развития инвазионных личинок D.repens
Впервые развитие D.repens до инвазионной стадии отмечено в комарах Ae.fasciata в 1913 г. В дальнейшем в качестве промежуточных хозяев D.repens отмечены комары родов Culex, Aedes, Anopheles, Mansonia, Armigeres.

В1955г. Было установлено, что срок развития D.repens зависит от вида промежуточного хозяина, при температуре 24-27°С и одинаковой влажности личинки достигают инвазионной стадии в организме комаров An.stephensi через 10-11, An.maculipennis - 12-13 и Ae.aegypti - 13-21 день.

По данным 1976г. оптимальная температура для развития личинок дирофилярий в условиях Нахичеванской АССР колеблется в пределах 27-28С. При такой температуре личинки первой стадии обнаруживаются через 1-2 дня с момента заражения комаров, 2-й стадии - на 4-7, а инвазионные личинки - на 9-10-е сутки. При 23-24°С развитие личинок завершается на 13-14 сутки, а при 19-20°С - личинки не достигают инвазионной стадии.

Инвазионные личинки обнаруживаются через 7 дней после заражения при температуре 29-31°С.
Сроки развития инвазионных личинок D.repens в организме комаров изучены авторами (И.А.Архипов, 1986; Д.Р.Архипова, 2003) аналогично, как и D.immitis. Развитие инвазионных личинок D.repens в организме комаров происходит в течение 11-15 дней.

Установлено, что с повышением концентрации микрофилярий в крови собак - прокормителей комаров, значительно снижалось развитие личинок в организме комаров. Большая концентрация личинок в организме комаров препятствует их развитию до инвазионной стадии. Они накапливаются в мальпигиевых сосудах, вызывают их рызрыв и гибель большого количества зараженных комаров.

Таким образом, высокая степень микрофиляриемии у собак не повышает репродуктивный потенциал D.repens, a способствует гибели комаров - промежуточных хозяев из-за их механического воздействия


Распространение дирофиляриоза собак России и стран ближнего зарубежья
Дирофиляриоз собак имеет повсеместное распространение. Зарегистрировано данное заболевание и в нашей стране.

Первый случай обнаружения D.repens описан в 1904г. в Харьковской области, а D.immitis впервые обнаружен в Азербайджане (1910).

Дирофиляриоз, вызываемый D.immitis, зарегистрирован в Туркменистане (1916), Уссурийском крае (1931), Абхазии (1937), Азербайджане (1937), Грузии (1943), Армении (1952), Крыму (1958). Хабаровском крае (1962), Узбекистане (1979).

Дирофиляриоз, вызываемый D.repens, обнаружен в Бухарской (1927), Ростовской областях (1929), Уссурийском крае (1931), Абхазии (1937), Азербайджане (1937; 1958), Киргизии (1941), Грузии (1943), Армении (1948, 1952), Узбекистане (1931; 1948; 1949), Кзыл-Ординской (1959; 1961), Семипалатинской областях (1961).

В 1913 г. обследованы на микрофиляриоз 597 собак б.Туркестана. При этом микрофилярии D.immitis были зарегистрированы у 10,2% собак.

По данным 1926, 1931г.г. 20,0% вскрытых собак заражены D.repens.

При исследовании собак г.Бухары (1928-1929), пораженных лейшманиозом, в крови были одновременно найдены микрофилярии D.repens и D.immitis.

В 1931г. установлена 10,0 и 2,5%-ная зараженность собак Амуро-Уссурийского края соответственно D.immitis и D.repens.

В Абхазии установлена 24,0 и 4,0%-ная зараженность собак соответственно D.repens и D.immitis по данным вскрытия (1937).

В 1937г. на территории Азербайджанской ССР обследовано методом полных гельминтологических вскрытий 151 собака и установлена 15,2%-ная зараженность их D.repens.

Методом полных гельминтологических вскрытий 52 собак г. Фрунзе у 1,9% обнаружены D.repens (1941).
По данным 1948г. у собак в Узбекистане встречается преимущественно вид D. repens.

В 1948, 1952г.г. при исследовании на дирофиляриоз 300 собак в Армянской ССР (методом прижизненной и посмертной диагностики) отмечено, что 22 собаки оказались инвазированными D.repens и 2 - D.immitis.

При обследовании методом полных гельминтологических вскрытий 139 собак г.Самарканда и Самаркандской области (1958) установлена 8,6%-ная их инвазированность D.repens.

В 1958г. указывалось на частое обнаружение дирофиляриоза (D.repens) у собак в Армянской ССР.

В течение 4 лет (1953-1956) были вскрыты 970 бродячих собак г. Кзыл-Орда, из них у 390 собак (42,6%) обнаружили в подкожной клетчатке и межмышечной соединительной ткани самцов и самок D.repens. В крови у всех 390 собак были обнаружены микрофилярии.

44,5-55%-ная зараженность собак D.repens отмечена в г. Нахичевань (1958).

0,6 и 0,3% собак Крыма заражены соответственно D.repens и D.immitis (1958).

Гельминтофауну собак Ташкентской области изучали в 1961г., была установлена 1,4%-ную зараженность собак D.repens.

По данным 1961г. 15% собак в Кзыл-Ординской области заражены D.repens при интенсивности инвазии от 2 до 14 экз.

Зараженность собак Семипалатинской области D.repens составила 6,2% при интенсивности инвазии от 2 до11 экз. (1961).

D.repens обнаружен (1962) в подкожной клетчатке 5 (4,7%) собак Ферганской и Кашка-Дарьинской области Узбекской ССР. Интенсивность инвазии составила 1-8 экз.

При исследовании методом полных гельминтологических вскрытий животных Хабаровского края D.immitis обнаружены у 2 из 7 и 10 из 77 вскрытых волков и собак, соответственно. У инвазированных животных дирофилярии локализовались в правом предсердии и легочных венах с интенсивностью инвазии 1-14 экз. У лисиц и енотовидных собак дирофилярии не найдено.

Сезонная динамика инвазированности собак дирофиляриями в Казахстане изучалась в 1976г.. Экстенсивность инвазии D.repens по областям Казахстана колебалась от 5,2 до 51,4% при интенсивности инвазии 1-39 экз., D.immitis - от 6,8 до 16,8% при интенсивности инвазии 1-5 экз. Автор находил в сердце D.immitis, в подкожной клетчатке - D.immitis, D.repens. В предгорной зоне Казахстана дирофиляриоз не обнаружен. В степной зоне D.repens установлен у 25,6, D.immitis - у 8,7% собак. В полупустынно-пустынной зоне в долинах рек D.repens и D.immitis находили соответственно у 14,1 и 7,0% собак.

Изучением распространения дирофиляриоза собак в Нахичеванской АССР (1979) установлена максимальная зараженность дирофиляриями D.repens в июне-июле в низменной зоне республики, где расположены обширные постоянные заболоченные участки. В горной зоне республики дирофиляриоз не обнаружен.

Из 67 исследованных служебных собак из разных районов Сурхандарьинской области (1983; 1986) у 30% обнаружены микрофилярии D.immitis.

Установлена 30%-ная зараженность собак дирофиляриями в г. Ростов-на-Дону (1997).

11,23% собак, прибывших в Ростовскую область из Волгоградской, Липецкой и Воронежской областей, Краснодарского и Ставропольского краев, Республики Кабардино-Балкарии, Северной Осетии, Чечни и из городов Южно-Сахалинск и Владивосток, оказались зараженными дирофиляриями (1999).

Из Ближнего Зарубежья, в зоне Полесья и Лесостепи Украины, у 3% исследованных собак обнаруживали D.repens (1999).
За 1998-2000 гг. проанализированы 66 случаев дирофиляриоза собак в регионе г.Киева и близлежащих областей. Отмечена максимальная зараженность собак в возрасте 5,5-7 лет с пиком в июле-августе.
Установили 23,9%-ную зараженность собак D.immitis в г. Краснодаре (2002).

Дирофиляриоз обнаружен у собак г. Саратова и Саратовской области. Из 470 исследованных животных у 60 в крови находили микродирофилярии. При вскрытии трупов собак в сердце обнаруживали взрослых D.immitis длиной 15-30 см (2002).

В Нижегородской области при вскрытии двух трупов служебных собак, прибывших из Чечни, в сердце и легочных артериях обнаружены D.immitis. С целью диагностики дирофиляриоза исследовали кровь 86 служебных собак из Зонального центра кинологической службы Нижегородской области. Выявлено 11 собак, зараженных дирофиляриями. Кроме того, заражение дирофиляриями отмечено у собак, прибывших для обучения из Северо-Кавказского региона. Передвижение зараженных собак из одного региона в другой приводит к созданию новых очагов дирофиляриоза и, тем самым, увеличивает риск появления данной инвазии среди людей (2002).

По данным 2001, 2002г.г. на долю дирофиляриоза, вызванного D.repens, из общей заразной патологии собак г. Волжского, приходится до 18%.

Таким образом, в последние годы наблюдается тенденция к распространению дирофиляриозной инвазии не только в южных районах, но и на территориях с умеренным климатом, где много рек и водоемов - мест выплода промежуточного хозяина. Отмечается быстрое распространение дирофиляриоза, вызванного D.repens, среди собак на Украине (1997; 1998; 1998).

В г.Новочеркасске установлена различная экстенсивность инвазии дирофиляриями в зависимости от районов (2003).

Авторами (И.А.Архипов, В.А.Башанкаев, Д.Р.Архипова, 2002; Д.Р.Архипова, 2003), впервые на территории Республики Калмыкия, у собак установлен дирофиляриоз, вызванный D.repens. Исследования крови показали, что дирофиляриоз регистрируется как в сельской местности, так и в городских условиях (г.Элиста). Экстенсивность дирофиляриозной инвазии у собак городской популяции составила 15,5, а у собак сельской популяции, в среднем, 23,6%. Среднее количество микрофилярий D.repens в 20 мм3 крови сельских собак было равным 247,3+26,8 и городских собак 112,7+11,4 экз. и колебалось от 14 до 836 экз. Получена значительная разница в инвазированности дирофиляриями собак городской и сельской популяций по данным их вскрытия. Экстенсивность инвазии составила у собак городской популяции 18,9 и собак сельской популяции 29,3%. Инвазированность животных в условиях сельской местности оказалась на 10,4% выше зараженности собак городской популяции, что, по мнению авторов, обусловлено большей плотностью популяции комаров - промежуточных хозяев и лучшими условиями передачи инвазии в сельской местности.

Среди факторов, объясняющих широкое распространение дирофиляриоза в мире за последние годы, основными являются: значительные передвижения людей с их домашними животными из одной страны в другую, увеличение численности собак, адаптация дирофилярий к разным промежуточным хозяевам и приспособленность личиночных стадий к развитию при разных температурных режимах.

Распространение дирофиляриоза в других странах мира
Большая работа по изучению эпизоотологии дирофиляриоза проводится учеными США.

Исследовано на дирофиляриоз 153 собаки г.Миссисипи, 30% оказались зараженными D.immitis(1953).

63% исследованных собак во Флориде оказались зараженными D. immitis (1954).

В крови 15,2% собак Мемфиса находили микрофилярий D.immitis и установили высокую положительную корреляцию между их плотностью в крови и количеством взрослых дирофилярий (1954).

Из 543 исследованных собак Нового Орлеана 44% были заражены D.immitis (1963).

Группа ученых изучала зараженность дирофиляриями собак разного возраста и породы в Северной Калифорнии. Ими установлено паразитирование D.immitis у двух собак породы лабрадорский ретривер и немецкая овчарка в возрасте 5-8 лет, содержащихся вне помещений. Резервуаром для инвазии авторы считают койотов (1981).

При исследовании собак в ветеринарной клинике Ворчестера (США) 9% оказались инвазированными D.immitis (1983). Не установлена зависимости количества микрофилярий в крови от числа взрослых дирофилярий, возраста нематод и количества самок дирофилярий. Установлены колебания числа микрофилярий в мл крови от 2200 до 137000 и взрослых - от 4 до 272 экз.

В 1984г. Была установлена 34,7%-ная инвазированность собак D. immitis в США.

За период с ноября 1979 по февраль 1982 гг. в шт.Луизиана (США) (1984) обнаружили микрофилярий D.immitis в крови 276 собак.

Имеется статистика зараженности собак D.immitis в шт.Калифорния за 1984-1988 гг., отмечается максимальную экстенсивность инвазии в 1984 г. По мнению исследователей, собаки, проводящие ночь вне помещений, на 50% больше поражены дирофиляриями по сравнению с собаками, содержащимися внутри помещений.

Исследования 1995г. отмечают снижение экстенсивности инвазии дирофиляриями в шт. Миннесота за последние 60 лет и объясняют это применением высокоэффективных препаратов, снижением количества осадков и, соответственно, мест выплода комаров -промежуточных хозяев и эффективной системой борьбы с комарами.

Исследованиями, проведенными на Цейлоне (1956), установлено, что основным паразитом собак являются D.repens. Около 60% собак в Шри-Ланке заражены D.repens (1997).

22 и 6 из 252 собак в Кении оказались зараженными соответственно D.immitis и D.repens (1962).

В Иране (1969) диагностирован у 60,8% бездомных собак дирофиляриоз, вызываемый D.repens. Подкожные узелки с дирофиляриями, чаще всего локализующиеся на конечностях, груди и грудной клетки, обнаружены у 35,7% зараженных собак. B 2002г. обнаружили микрофилярий D.immitis в крови 8,4% исследованных собак г.Тебриз. Соотношение зараженности дирофиляриями городских и сельских собак составило 4:1. Исследователи установили зараженность D.immitis лисиц, волков и шакалов в окрестностях г.Тебриз и считают это место одним из самых эндемичных районов в Иране.

В 1969г. отмечено увеличение числа собак, зараженных дирофиляриями, в Австралии. У одной исследованной собаки микрофилярий D.immitis в крови не находили, а при вскрытии обнаружили до 200 взрослых дирофилярий. Исследователь указывает на осторожность при проведении дегельминтизации, так как лечение может привести к большему ущербу для здоровья, чем сама инвазия, так как в результате проведенного лечения возможна закупорка легочных артерий погибшими гельминтами и вследствие этого гибель собаки. В 1992, 1996г.г. при изучении динамики распространения дирофиляриоза у собак в Сиднее, отмечали повышение экстенсивности инвазии. Так, по данным в 1973 г. 5% собак были инвазированы D.immitis. В 1982-1983 и 1992 гг. экстенсивность инвазии среди собак повысилась и составила 12,6 и 14,8%, соответственно.

В Малайзии у собак паразитируют дирофилярий вида D.immitis (1976), установлена 25,8%-ная инвазированность ими собак. Из 100 исследованных бродячих собак в крови 21% обнаружены микрофилярий (1986), у 41% которых при вскрытии находили взрослые D. immitis. По данным 1986г. в Малайзии 3,5-32,4% собак заражены D.immitis.

На Кубе (G.F.Sotolongo, 1977) 6,86% собак заражены D.immitis.

В 1979г. исследовано 400 собак в Индии и установлена их зараженность D.immitis и D.repens. В 1985 г. инвазированность дирофиляриями собак в Индии составила 24,2%.

Из 1721 собак, исследованных в Японии (г.Нагасаки), в крови 32,7% обнаружили микрофилярий D.immitis (1980). 25,2% исследованных собак в окрестностях г.Токио оказались инвазированными дирофиляриями (1981).

В Тайване у 5,3% исследованных собак (1996) обнаружили в крови микрофилярий D.immitis. За последние годы (2001) в Тайване значительно увеличилось количество собак, зараженных дирофиляриями. В 2003г. было проведено вскрытие 82 бездомных собак в окрестностях Тайчжунга (Тайвань). У 54% зараженных собак дирофилярий находили в легочной артерии или правом предсердии. При исследовании мазков крови микрофилярий D.immitis выявляли в 63,6% случаях. По данным 2003г. дирофиляриоз регистрируется у 4-41% собак Тайваня и имеет тенденцию к дальнейшему распространению.

В 1982г. на Филиппинах у собаки отмечена нехарактерная локализация D.immitis в жидкости передней и задней камеры глаза.

В Куала-Лумпуре (Малайзия) 22,5% бродячих собак были заражены дирофиляриями. В организме собак находили от 1 до 76 экз. взрослых D.immitis (1993).

18% из 225 исследованных собак в Доминиканской Республике были заражены D. immitis (1989).

В Бразилии собаки инвазированы дирофиляриями вида D.immitis. Наибольшая зараженность установлена у бродячих собак вдоль побережья Бразилии (1999). По результатам исследований (1999) дирофиляриями заражены 14,3-35,7% собак г.Ресифи на северо-востоке Бразилии. Микрофилярии обнаружены в крови 62 из 2007 собак на севере Бразилии (2000). По данным 2000, 2002г.г. в Аргентине увеличивается число случаев дирофиляриоза, вызванного D.immitis, у собак.

За период с 1981 по 1990 гг. в Панаме 13,8% обследованных собак оказались зараженными дирофиляриями.

В среднем, у одной собаки в Китае (1999) находили по 5 взрослых D.immitis в сердце и легочных артериях.

При исследовании 485 собак в пяти областях дельты р.Меконг (Вьетнам) методом посмертной экспертизы была установлена 58,97%-ная инвазированность собак D.immitis. Средняя интенсивность инвазии была 9,85 экз. D.immitis на собаку. Отмечено различие в экстенсивности инвазии в регионах с минерализованной водой (50,85%) и пресноводной (71,35%). Большинство дирофилярий обнаружено в желудочке (94,76%) и легочной артерии (81,22%). Наиболее часто наблюдали воспаление легочной артерии (2001).
1,5%-ную зараженность собак дирофиляриями установили в Южной Корее (2002). Там же в 2003г. установили 40%-ную зараженность собак D.immitis.

В Турции из 280 исследованных собак 9,3% оказались инвазированными D.immitis (2003).

У трех собак из Саудовской Аравии (2003) обнаружили признаки дирофиляриоза: эритему, алопецию, подкожные узелки и гиперкератоз. При исследовании крови найдены микрофилярии D.repens.

Дирофиляриоз собак широко распространен в Италии. Многочисленные работы посвящены изучению эпизоотологии дирофиляриоза, вызываемого паразитированием как D.immitis, так и D.repens. Так, в 4 провинциях Италии и в г.Венеция исследовали 773 собаки (1986) клинически, гематологическим методом путем обнаружения микрофилярий и при вскрытии павших собак. Зараженность собак D.immitis колебалась от 2,1 до 28,9%. Инвазированность собак D.repens составила 0,5-8,3%. По данным 1989г. из европейских стран в Италии отмечено наибольшее распространение дирофиляриозной инвазии. В 1991г. изучалась эпизоотология и профилактикя дирофиляриоза собак в Италии и отмечено повышение экстенсивности инвазии за последние годы. Проведено исследование крови 2628 собак на северо-западе Италии из эндемичных районов (1996), где прежде не применяли микрофилярициды. Сравнение результатов исследований с данными по зараженности за предыдущие 25 лет показало повышение зараженности собак в 3-4 раза. У 0,5% собак Сицилии (1997) обнаружили D.immitis. 25,6% собак оказались инвазированными D.repens. Случай подкожного дирофиляриоза, вызванного D.repens, отмечен у собаки, привезенной в Италию из США (2000). В период с 1999 по 2000 гг. исследовали кровь 351 собаки без признаков дирофиляриоза усовершенствованным методом Knott и гистохимическим окрашиванием микрофилярий. 0,8% собак оказались зараженными D.repens, a 0,6% D.repens и D.immitis одновременно.

Об обнаружении D.immitis и D.repens у собак в Испании сообщали в 1990,1991г.г.. В различных районах Испании отмечена 0,3-9,35%-ная инвазированность собак D.repens (1996). Экстенсивность инвазии собак дирофиляриями в Испании по данным 1998г. составляет 12,8%. Сообщается о преимущественном распространении среди собак Испании дирофиляриоза, вызванного D.repens (2000).

По данным 1996, 2001г.г. 12-37% собак в Греции заражены D.repens.

При исследовании собак юга Швейцарии и северных районов Италии (2001) установили 10,7 и 5,5%-ную инвазированность их соответственно D.immitis и D.repens.

В последние годы отмечается тенденция к распространению дирофиляриоза собак на север. В 1987г. среди ветеринарных врачей Канады проведен анкетный опрос, чтобы оценить ситуацию по дирофиляриозу. По результатам опроса было установлено, что 0,35% собак заражены дирофиляриями. В шт.Онтарио зарегистрировано максимальное количество случаев дирофиляриоза (1988). В 1989г. в г. Квебеке у 47 собак установлен дирофиляриоз. В 2000г. установили дирофиляриоз, вызванный D.immitis, у 0,16% собак в 4 провинциях Канады.

В 1978г. описано несколько случаев дирофиляриоза у собак в Нидерландах, завезенных из эндемичных стран

В 1982г. сообщали о первом случае дирофиляриоза в Венгрии у двух импортированных собак в возрасте 2 лет. Дирофилярий нашли в правом желудочке сердца.

Исследования 1984г. указывают на возможность широкого распространения дирофиляриоза собак в Великобритании в связи с наличием благоприятных условий для развития паразита и промежуточного хозяина. При температуре окружающей среды ниже 21,1°С значительно снижается развитие личинок D.immitis в организме комаров, а снижение температуры ниже 15,6°С может привести к летальному исходу личинок паразита. Средняя температура воздуха в теплые месяцы года в Лондоне составляет 22°С, что несколько ниже, чем в других регионах страны. Авторы указывают, что дирофиляриоз больше распространен в тропических и субтропических странах. В 1985г. сообщалось о случае дирофиляриоза, вызванного D.immitis, у собаки в Великобритании.

Первый случай обнаружения D.repens у собаки в Норвегии описан в 1998г.

Случаи дирофиляриоза, вызванного D.immitis и D.repens, отмечены у собак и людей в Болгарии (1996). В 2001г. установилена 7,4%-ная инвазированность собак D.immitis. Наибольшую зараженность отмечали у бездомных и сельских собак.

12-30% собак Португалии заражены D.immitis (1996). Микрофилярии D.immitis были обнаружены в крови 5 собак в северо-восточной Португалии (1998). У одной собаки микрофилярии находили в костном мозге, подкожных узелках, селезенке и лимфатических узлах.

Более 20% служебных собак во Франции инвазированы дирофиляриями D.repens (1996).

Одновременное паразитирование дирофилярий двух видов, D.immitis и D.repens, отмечают у собак и других плотоядных в Греции (1997), в Италии, Испании, Франции, Португалии, Швейцарии, Германии (1998).

Дирофиляриоз установлен у 11 (2,2%) из 479 собак на юге Швейцарии. Из них микрофилярии D.immitis обнаружены у 3 (0,6%), a D.repens - у 8 (1,6%) собак. На юге Швейцарии имеются все предпосылки для развития этой инвазии.

На Канарских островах (Испания) в 1994, 1995 и 1996 гг. установлена соответственно 67,02; 58,92 и 52,18%-ная инвазированность собак D.immitis (1998). По данным исследователей дирофиляриоз больше распространен на территориях с сухим степным климатом, чем с сухим пустынным.

В 1993-1996 гг. при исследовании собак в Германии 5 собак оказались зараженными D.repens, из которых 2 были импортированы из Греции и Италии. У 45 собак установили паразитирование D.immitis. В 1998г. установили, что 10% собак, ввезенных в Германию из Италии, Испании или Португалии, инвазированы D.immitis, которые также обнаружены у 12% американских полицейских собак, использующихся на службе в войсках, размещенных в Германии.

Дирофиляриоз, вызванный D.repens, обнаружен у собак, импортированных из Венгрии и Греции в Австрию (2001).

С 1998 по 2001 гг. в Израиле зарегистрировано 8 случаев дирофиляриоза у собак, вызванного D.repens (2002).

Дирофиляриоз собак зарегистрирован в Коста-Рике (1990), ЮАР (1991), Самоа (1992), Новой Каледонии (1994), Австралии (1994), Аргентине (1995), Германии (1996), Турции (1997), Габоне (1998), Швейцарии (1998), Румынии (1998), Египте (1998), Иране (1998), Болгарии (1999), Венгрии (1999), Франции (1994; 1999), Колумбии (2000), Таиланде (2001), Мозамбике (2002) и других странах.

Установлена прямая корреляция между экстенсивностью инвазии дирофиляриями, плотностью популяции комаров и количеством выпавших осадков.

Распространение дирофиляриоза носит очаговый характер, т.е. заболевание регистрируют на территориях с влажным климатом, где много рек, водоемов, а также на побережье и где и

 Отправлено: 20.03.07 13:35. Заголовок: Re:

Факторы, влияющие на зараженность дирофиляриями

На зараженность дирофиляриями собак могут влиять такие факторы, как пол, возраст, порода, длина шерстного покрова, способ содержания и использования собаки и др.
По данным 1953 г. в большей степени инвазированы дирофиляриями собаки крупных пород и короткошерстные.

Однако ряд исследователей (1961, 1963) не установили зависимости зараженности дирофиляриями от пола животного и длины его шерсти. Отметив при этом, что степень инвазированности была выше у собак, содержащихся частично в помещениях, частично в загоне, чем у собак, содержащихся только в помещении.
Исследованиями проведенными в Австралии (1969, 1973), установлено, что кобели заражаются D.immitis чаще, чем суки. Наибольшее количество микрофилярий в крови обнаруживали у тех собак, у которых при вскрытии находили максимальное количество взрослых дирофилярий. Не установлено зависимости зараженности собак от породы, возраста и длины шерстного покрова.

В большей степени дирофиляриозом в Малайзии были заражены собаки в возрасте 5 лет массой тела свыше 15 кг (1976).

При изучении дирофиляриоза в Нахичеванской АССР (1976, 1979) установлена максимальная зараженность дирофиляриями D.repens собак породы немецкая овчарка. В высокой степени инвазированы собаки в возрасте старше 5 лет. У щенков до года дирофилярий не обнаруживали.

Зараженность дирофиляриями сук и кобелей находится в соотношении 1:4 (1979).

При исследовании 40 собак в Индии (1979) была установлена наибольшая зараженность дирофиляриями собак в возрасте 3,5-7 лет. Собаки в возрасте до 3,5 лет и 10-14 лет оказались не инвазированными. Наибольшая экстенсивность инвазии (6,7%) - у дворовых собак. Больше были заражены кобели.

Пол, возраст, порода и масса (исследования 1980г., D.immitis) являются важными факторами при диагностике дирофиляриоза. Кобели в возрасте 4-7 лет охотничьих и спортивных пород массой свыше 22 кг были максимально инвазированы. Что может быть объяснено большей подвижностью самцов и вероятностью более длительного контакта с промежуточным хозяином. Собак с повышенным фактором риска заражения дирофиляриозом необходимо исследовать чаще.

У собак в возрасте 1 года в г.Нагасаки (Япония, 1980) установили 8,8% зараженность дирофиляриями. 29,5%-ная зараженность была у собак в возрасте 2 лет и достигала 38,1-51,9% у собак старших возрастных групп. 27,6; 32,6; 23,3; и 27,0% инвазированных дирофиляриями собак г.Токио были в возрасте соответственно 1-2, 2-4, 4-6 и 6-8 лет. Собаки в возрасте до года были свободными от D.immitis (1981).

И.А.Архипов и др. (1983, 1986) исследовали служебных собак из разных районов Сурхандарьинской области с целью обнаружения микрофилярий. Собаки в возрасте 3-4, 5-6 и 7-8 лет оказались зараженными D.immitis соответственно на 50,0; 45,4 и 37,5%. Собаки в возрасте до 2 и старше 10 лет были инвазированы слабо. Микрофилярий не находили в крови у собак в возрасте до года.

Серологическим методов установлена 34,7%-ная инвазированность собак D.immitis в США (1984). С увеличением возраста собак до 8 лет зараженность D.immitis возрастала, а у собак старше 8 лет снова снижалась.

Инвазированность собак в шт.Луизиана (США) в возрасте 0,5-1, 1-2, 2-4, 4-7, 7-10 и старше лет составила соответственно 5,8; 16,7; 34,8; 27,5; 12,7 и 2,5% (1984). Зараженность сук и кобелей D.immitis оказалась равной соответственно 25,0 и 58,0%. Собаки породы лабрадор ретривер, немецкая овчарка, кокер спаниель, ирландский сеттер, доберман, пойнтер, золотистый ретривер, английский сеттер и помесные были инвазированы D.immitis соответственно на 7,6; 7,2; 6,5; 5,1; 4,7; 2,5; 2,2; 2,2 и 25,7%. На 22,4 и 51,3% были заражены собаки соответственно с коротким и длинным волосяным покровом (???). 23,5; 15,9 и 60,6%-ная инвазированность установлена соответственно у мелких, крупных и средних по размеру собак.

В большей степени заражены дирофиляриями собаки в возрасте старше 3 лет, содержащиеся, главным образом, на открытом воздухе в сельских районах Канады (1988).

В Нидерландах D.immitis установлены у собак, завезенных из других стран, неблагополучных по дирофиляриозу, и отмечена наибольшая инвазированность кобелей (1988).

В Иране в большей степени заражены собаки старше 10 лет Разницы в зависимости от пола не отмечено (1998).

Исследованиями (Канарские острова, Испания, 1998) установлено, что зараженность кобелей на 12% выше, чем у сук.

По данным С.В.Величко и др. (2000) среди зараженных дирофиляриозом, вызванным D.repens , в Украине преобладали собаки короткошерстных пород: боксер, доберман, немецкая овчарка и др.

При анализе 66 случаев дирофиляриоза собак в г.Киеве и близлежащих областях Н.С.Василик (2001) отмечала максимальную зараженность собак в возрасте 5,5-7 лет.

Исследования (Болгария, 2001) зараженности дирофиляриями D.immitis служебных, пастушьих, сельских, бродячих собак и собак-компаньонов установили соответственно их 7,7; 7,4; 10,9; 12,5 и 1,4%-ную зараженность.

При исследовании 485 собак в пяти областях дельты р.Меконг (Вьетнам, 2001) было установлено, что интенсивность инвазии увеличивается с возрастом. Собаки в возрасте старше 3 лет были инвазированы на 100%.

В Корее (2001) собаки в возрасте 1-3, 4-6 и 7-13 лет заражены D.immitis соответственно на 16,0; 26,8 и 37,8%. Отмечена большая зараженность сук (2002).

В условиях Тайваня максимально заражены D.immitis собаки в возрасте 10-15 лет (2001).

По данным 2002 г. зараженность кобелей и сук D.immitis в Аргентине существенно отличалась и составила соответственно 62,5 и 37,5%. Разница в инвазировании чистопордных и помесных собак была незначительной.

Б.Л.Гаркави, Ф.С.Михно (2002) изучали распространение дирофиляриоза среди собак в Краснодаре. 30,4 и 11,7%-ная инвазированность отмечена у собак в возрасте соответственно 1-7 и 8 и старше лет. Собаки до года не были инвазированы.

Методом ELISA исследовали собак в Южной Корее (2003). Самцы были заражены выше, однако разница была несущественной. Собаки в возрасте до 2-х лет, 2-4, 4-6 и старше 6 лет оказались зараженными D.immitis соответственно на 10,4; 46,5; 48,4 и 50,3%. Наибольшая зараженность (69,5%) отмечена у собак прибрежных районов.

По данным М.А.Фисько, А.Н.Островского (2003) дирофиляриоз зарегистрирован в г.Новочеркасске у собак всех возрастных групп, начиная с 7 месяцев. Кобели больше заражены, чем суки. Экстенсивность инвазии не зависит от густоты волосяного покрова.

В связи с тем, что данные по влиянию различных факторов на зараженность собак дирофиляриями весьма противоречивы, авторами монографии изучена инвазированность собак разного пола, возраста, породы и характера использования в Республике Калмыкия (И.А.Архипов, В.А.Башанкаев, Д.Р.Архипова, 2002; Д.Р.Архипова, 2003). Установлено, что собаки всех возрастных групп, за исключением животных до года, инвазированы D.repens.

Экстенсивность инвазии собак составила в возрасте до года 0% (исследовано 22 собаки); 1-3 лет 18,6% (исследовано 43); 4-6 лет 31,9% (исследовано 47); 7-9 лет 28,9% (исследовано 38) и старше 10 лет 26,7% (исследовано 30).

Результаты гельминтологических вскрытий подтверждают данные исследований крови о более высокой степени инвазированности собак в возрасте 4-6 лет. Зараженность дирофиляриями собак всех возрастных групп, за исключением животных до 1 года, свидетельствует об отсутствии возрастного иммунитета у собак к заражению дирофиляриями.

При анализе полученных результатов исследований крови 162 сук и 166 кобелей нами не установлено существенной разницы в показателях их экстенсинвазированности D.repens и среднего количества микрофилярий в 20 куб.мм периферической крови в зависимости от пола. Суки оказались инвазированы на 22,8, а кобели на 24,7%.

В результате проведенных опытов авторами установлено, что пол собак не оказывает существенного влияния на инвазированность их дирофиляриями.

Результаты изучения и анализа результатов проб крови собак разных пород свидетельствуют о колебаниях в их инвазированности дирофиляриями. Инвазированность собак породы немецкая овчарка (исследовано 12) составила 33,3, кавказская овчарка (исследовано 13) 30,7, лайка (исследовано 11) 27,3, такса 28,5 (исследовано 7), боксер 25,0 (исследовано 12), колли 22,2 (исследовано 9), доберман 22,2%(исследовано 9). В меньшей степени были инвазированы беспородные собаки(исследовано 32) и собаки породы ризеншнауцер (исследовано 10). Таким образом, нами не установлено значительного влияния породы на инвазированность собак дирофиляриями.

При исследовании проб крови 115 собак, в том числе 17 квартирных собак (содержащихся, в основном, в квартирах с выгулом на улице), 19 служебных (содержащихся на цепи), 20 дворовых, 16 бродячих (т.е. бездомных), 13 охотничьих и 30 прифермских (приотарных, чабанских) собак, установлена значительная разница в инвазированности их D.repens, соответственно 11,7; 21,0; 25,0; 31,2; 23,1 и 30,0%.

В максимальной степени инвазированы дирофиляриями бродячие собаки, экстенсивность инвазии которых составила 31,2%, и среднее количество микрофилярий в 20 куб.мм крови 316,2+22,4 экз. Высокой оказалась инвазированность чабанских (приотарных) собак. Экстенсивность инвазии их составила 30% при обнаружении в 20 куб.мм крови 268,3+20,7 экз. микрофилярий.

В меньшей степени были заражены квартирные собаки, экстенсивность инвазии которых была равной 11,7% при наличии в 20 куб.мм крови двух собак 54 и 77 экз. микрофилярий. Слабая зараженность квартирных собак, вероятно, обусловлена хорошими условиями содержания и, в первую очередь, меньшей возможностью контакта с промежуточным хозяином.

Таким образом, собаки, содержащиеся в разных условиях, оказались зараженными D.repens в разной степени. Максимально инвазированы дирофиляриями бродячие и приотарные собаки.

В результате проведенного анализа данных литературы и собственных исследований установлено, что на зараженность дирофиляриями могут влиять различные факторы. Данные литературы весьма противоречивы, однако можно сделать вывод, что в максимальной степени заражены дирофиляриями собаки в возрасте 4-9 лет, крупных пород. Значительное влияние на зараженность дирофиляриями оказывает характер использования собак: бродячие, приотарные и охотничьи собаки заражены в большей степени из-за большего контакта с комарами промежуточными хозяевами дирофилярии.

Распространение дирофиляриоза среди людей

Дирофиляриоз установлен и у человека, хотя он не является характерным хозяином для данной инвазии, и дирофилярии не достигают половой зрелости в его организме. Первый случай обнаружения дирофилярии в сердце диагностирован у мальчика в Бразилии в 1887г. Обычно у человека дирофилярии не достигают половозрелой стадии и, соответственно, не продуцируют микрофилярий. В медицинской литературе имеется только одно сообщение о микрофиляриемии у человека (1994) и обнаружении дирофилярий обоего пола у 3-х летнего мальчика в Шри-Ланке (2000).

В 1961г. впервые описан случай инфаркта легкого, вызванного паразитированием неполовозрелых D.immitis. В настоящее время известно 84 случая легочного дирофиляриоза у человека.

S.Pampiglione, G.C.Trotti, F.Rivasi (1995) провели анализ литературных данных по распространению D.repens среди людей. Дирофиляриоз подкожной клетчатки зарегистрирован в странах Южной и Восточной Европы, Средней и Центральной Азии, Шри-Ланке и т.д. Заболевание чаще всего проявляется в виде подкожных узелков, расположенных на голове, груди или предплечьях.

Подкожный узелок, содержащий D.repens (S.Pampiglione et al., 1995)

В 30,9% случаях преимагинальных дирофилярий находят под конъюнктивой глаза.

D.repens под бульбарной конъюнктивой, видимая невооруженным глазом (S.Pampiglione et al., 1995)

Случаи заражения человека дирофиляриями, в частности, D.repens, отмечены во Франции (1998), Израиле (1999), Венгрии (1999; 2000), Индии (2001), Словении (2001).

Зарегистрировали первый случай дирофиляриоза человека в Турции (1998). D.repens идентифицированы при гистологическом исследовании узелка, расположенного в области лба женщины. В дальнейшем, дирофиляриоз диагностирован у мужчины на юге Турции (2002). Неполовозрелую D.repens извлекли из субконъюнктивальной жидкости глаза.

В Китае (1999) описали несколько случаев локализации дирофилярий в легких с образованием гранулем.

В Италии у больных людей дирофилярий чаще всего находили в подкожной ткани.

Максимальное число случаев дирофиляриоза у человека приходится на Италию (70%), затем Францию (17%), Испанию (15%) и Грецию (9%). Паразитирование дирофилярий отмечено и в печени. Первый случай обнаружения неполовозрелого самца D.immitis в печени человека описали в 2002г.

В Югославии (2003) зарегистрировали первый случай обнаружения неполовозрелой самки D.immitis под конъюнктивой глаза женщины.

Дирофиляриоз человека зарегистрирован в России и странах Ближнего Зарубежья. О случаях дирофиляриоза, вызванного D.repens, сообщали Н.Г.Храмелашвили (1957) в Грузии, Ю.А.Березанцев (1961) в г.Ленинграде, А.Ф.Тумка (1966) в Белоруссии, Л.Н.Самойлович, З.О.Жмак (1966) в г.Грозном, М.Н.Султанов, Г.Х.Гусейнов (1967) в Армении, Ю.Казлаускас, И.Яутакене (1969) в Литве, Р.С.Розенбаум (1970) в Молдавии, Л.П.Савченко (1972) на Северном Кавказе, А.П.Мельниченко, Т.А.Просветова (1971), А.С.Энгельштейн, Р.М.Кигель, Г.И.Запорожец (1973), Л.Г.Муквоз, Н.И.Белозерская (1975) на Украине, В.С.Беляев и др. (1989) в Краснодарском крае, В.П.Мирошников и др. (1990), А.А.Артамонова, С.А.Нагорный (1996) в г. Ростове-на-Дону, М.В.Кочеткова (1998) в Нижнем Новгороде, Е.Ю.Нараленкова, Т.Д.Кривостаненко (2002) в гг.Новосибирске и Барнауле.

За период 1983-1984гг. отмечено 6 случаев дирофиляриоза у людей, проживающих в Крыму (М.А.Борисова и др., 1986). У больных наблюдали образование подкожных узелков, располагающихся на открытых участках тела, при вскрытии которых находили D.repens. Авторы сообщают о нехарактерной локализации дирофилярий у женщины 40 лет. При операции в брюшной полости у нее в брыжейке был обнаружен гельминт, идентифицированный как D.repens.

Взрослых и неполовозрелых дирофилярий находили в лимфатическом узле (Н.И.Бешко и др., 1995), глазной жидкости, конъюнктиве и стекловидном теле у людей на Украине (О.Давыдов и др., 1996).

Т.И.Авдюхина и др. (1996) проанализировали 110 случаев дирофиляриоза у человека, вызванного D.repens, на территории Российской Федерации и странах СНГ. Авторы пришли к выводу, что почти 50% из всех случаев приходится на дирофиляриоз органов зрения. Поражения проявляются в виде подкожных или субконъюнктивальных узелков, отечностью. Иногда поражаются слезные железы. Дирофилярий могут мигрировать под слизистой оболочкой или кожей на значительные расстояния. Некоторые больные могут видеть дирофилярий под конъюнктивой самостоятельно.

Случаи дирофиляриоза зафиксированы у людей в Московской, Тульской областях и Алтайском крае (Т.И.Авдюхина, В.Г.Супряга, В.Ф.Постнова, 1997).

В.Ф.Постнова и др. (1997) указывают, что из 25 случаев дирофиляриоза, зарегистрированных за последние годы, 21 случай приходится на Астраханскую область.

Н.А.Азарова, В.П.Прейдер (1999) описывают 5 случаев дирофиляриоза в г. Барнауле (Алтайский край). Все дирофилярий локализовались на лицевой части головы и при хирургическом удалении идентифицированы как D.repens.

При хирургическом удалении опухоли у двух женщин в г.Минске (Республика Беларусь) были обнаружены фрагменты самок D.repens (Л.И.Карпук и др., 2000).

О случаях дирофиляриоза у человека в Астраханской области сообщали В.В.Гуськов и др. (2001), в Тюмени - А.В.Ушаков, Т.Ф.Степанова, А.С.Стругова (2002).

За 2000-2002гг. выявлено в Москве и области 11 случаев дирофиляриоза у людей в возрасте 4-72 лет (А.М.Бронштейн, В.Г.Супряга и др., 2003). В 3-х случаях дирофилярий D.repens локализовались в мужских половых органах у детей (М.В.Григорьев, Е.В.Дворовенко, 2003). К 2004г. в России отмечено уже 300 случаев дирофиляриозной инвазии у человека (В.Г.Супряга и др., 2004). Однако, авторы указанных исследований утверждают, что эти данные не отражают истинной ситуации, так как много случаев остается неучтенными. Очевидно, заболеваемость дирофиляриозом будет увеличиваться из-за снижения иммунологического статуса человека в результате загрязнения окружающей среды.

Таким образом, за последние годы число случаев дирофиляриоза у людей значительно повысилось. В настоящее время дирофиляриоз встречается не только в южных регионах. Ареал заболевания расширяется на север, захватывая все большие территории. Причиной этому могут быть несколько факторов. В последние годы отмечается общее потепление климата; не ограниченны перемещения животных, в том числе собак, из одного региона в другой; увеличение популяции собак; неограниченные возможности для туризма. Все это создает благоприятные предпосылки для создания новых очагов дирофиляриоза собак, что увеличивает риск заболевания людей данным гельминтозом.

Сравнительно редко можно диагностировать дирофиляриоз у человека клинически (только в случае локализации неполовозрелых дирофилярий в глазу). Диагноз, чаще всего, ставят после хирургического удаления опухолевидных образований или биопсии. В связи с тем, что лечение дирофиляриоза у людей возможно только хирургическим путем, проблема эта является особенно актуальной.


Патогенез и клиника

Дирофилярий оказывают патогенное влияние на организм собак и человека. Они поражают сердце, легкие, печень, почки и иногда другие органы и ткани, нарушая их функцию.

Патогенное действие на организм животных могут оказывать и микрофилярии. Z.Kawakami, I.Nagasawa (1926), используя гистохимические методы, изучали распределение микрофилярии в органах и тканях собак, зараженных D.immitis, при посмертном вскрытии. Была установлена высокая концентрация микрофилярии в легких, сердце, печени, почках, кишечнике, желудке, селезенке, пищеводе, дыхательных мышцах и языке.
T.Terui (1926) обнаружил, что микрофилярии D.immitis, введенные внутривенно кроликам, улавливались легкими, сердцем и дыхательными мышцами и в незначительном количестве находились в других частях тела.

D.Katamine, S.Shibata (1959) подробно изучили распределение микрофилярии D.immitis в организме живых собак. Собак анестезировали и при помощи специального приспособления брали пробы крови из легочных капилляров, легочной артерии и вены, камер сердца, аорты, полой вены, бедренной артерии и вены и капилляров кожи. У всех собак концентрация микрофилярии была самой высокой в капиллярах легких как в дневное время, так и ночью. Значительно меньшее их количество отмечали в сердце, легочной артерии и в коже.

При микроскопическом исследовании паренхиматозных органов и тканей собак, зараженных дирофиляриями, по результатам исследований проб крови установлены значительные изменения (И.С.Согоян, 1962). В сердечной мышце микрофилярии встречаются как в сосудах, так и в просвете капилляров. Стенки таких сосудов утолщены, просветы сужены. Нередко вокруг капилляров встречаются широкие полосы кровоизлияний. В мышечных волокнах наблюдается зернистое перерождение и, в большинстве случаев, поперечная исчерченность нарушена. В просветах сосудов легочной ткани микрофилярии нередко попадались в большом количестве. Довольно часто наблюдали кровоизлияния размером в одну или две альвеолы. В печени сосудистая сеть сильно гиперемирована. В просвете сосудов много распавшихся эритроцитов.

Печеночные клетки сдавлены, наблюдается жировое перерождение. В просвете сосудов селезенки встречается большое количество микрофилярий. Стенки сосудов утолщены, строение их нарушено. Под влиянием продуктов обмена веществ микрофилярий происходит распад эритроцитов и скопление в различных органах и тканях больных собак железосодержащего пигмента, который особенно интенсивно откладывается в клетках ретикулоэндотелиальной системы печени и селезенки. Наряду с этим, продукты обмена и механического повреждения вызывают воспаление или же дистрофические изменения и расстройство кровообращения в органах и тканях.

В первую очередь, заболевание проявляется клинически в виде расстройства функции дыхания. При поражении печени развивается печеночный синдром.

В опытах 1966г. установлено, что у собак без видимых клинических признаков дирофиляриоза при вскрытии находили 25 экз. D.immitis, с признаками - до 47, с типичными признаками - 58, с признаками печеночной недостаточности - 101 экз. У собак с признаками печеночной недостаточности D.immitis локализовались, в основном, в полой вене и правом предсердии.

По данным (1966, 1983) при дирофиляриозе возможна трансплацентарная передача микрофилярий эмбриону.

Животные при дирофиляриозе теряют работоспособность и активность, что особенно проявляется у охотничьих и служебных собак. Неполовозрелые дирофилярии из сердца мигрируют в легочные артерии, часто при этом вызывая воспаление и пневмонию.

При дирофиляриозе, вызванном паразитированием D.immitis, появляются многочисленные изменения в легких: дилятация, тромбоз и обструкция легочной артерии, геморрагии, гемосидероз, хроническое воспаление, фиброз (1969, 1970).

Клинические признаки дирофиляриоза могут отсутствовать в течение нескольких лет, в то время как в крови микрофилярий присутствуют. У некоторых собак при слабой инвазии клиника дирофиляриоза вообще отсутствует. При этом, не проявляясь клинически, заболевание неограниченно распространяется на новые территории. Степень проявления признаков дирофиляриоза зависит от различных факторов: количества взрослых дирофилярии, длительности заболевания, анатомической локализации гельминтов, индивидуальной восприимчивости, вторичных изменений в органах (печень, почки и т.д.). Одним из основных клинических признаков дирофиляриоза является слабый сухой кашель. Служебные собаки быстро утомляются, у них развивается диспноэ, а затем может наступить коматозное состояние. Паралич сердца, асцит, отек конечностей также являются клиническими признаками заболевания. Некоторые зараженные собаки истощены, имеют маленький вес, несмотря на хороший аппетит, анемичны. Иногда в диагностике дирофиляриоза, вызванного D.immitis, помогает аускультация сердца и легких. Однако нарушения в этих органах могут не прослушиваться (1974).

По данным 1974г. приблизительно у 5-10% инвазированных дирофиляриями собак в периферической крови не обнаруживают микрофилярий. В этом случае можно предположить, что паразитирует только самцы или только самки, только неполовозрелые гельминты, микрофилярии развиваются во внутренних органах, гибель взрослых нематод в результате дегельминтизации и иммунологические факторы. Было установлено, что щенки, рожденные от сук, зараженных дирофиляриями во время щенности, имели микрофилярий в крови с самого рождения, т.е. микрофилярий проникали через плаценту. Эти щенки будут сенсибилированы к микрофиляриям. Если щенку инокулировать инвазионных личинок через укус комара, заражение произойдет как обычно: микрофилярий будут продуцироваться, но будут улавливаться легкими и не смогут циркулировать в крови. У таких собак также развивается латентный дирофиляриоз.

C.A.Rawlings et al. (1982) подробно описали 4 типа латентного (отсутствие микрофилярий в крови) дирофиляриоза, которые не диагностируются. К 1-му типу относится препатентная стадия заболевания, соответствующая первым 6 месяцам после заражения. Ко 2-му типу латентного дирофиляриоза относится однополое заражение, когда при исследовании крови микрофилярий не находят, а при вскрытии обнаруживают только взрослых самцов или самок дирофилярий. Воздействие антгельминтиков на воспроизводительную функцию дирофилярий, приводящее к их стерилизации, относится к 3-му типу. 4-й тип латентного дирофиляриоза обусловлен иммуномодуляторами.

Данные по влиянию дирофилярий на гематологические и биохимические показатели противоречивы. В опытах, проведенных C.A.Rawlings, A.K.Prestwood, В.В.Beck (1980), влияния D.immitis на 'количество эозинофилов и базофилов в крови собак не установлено.

Однако гематологическими исследованиями M.C.Sharma, S.P.Pachauri (1982) отмечено снижение концентрации гемоглобина, ускорение реакции оседания эритроцитов и увеличение числа лимфоцитов в крови собак, инвазированных D.immitis. Биохимический анализ сыворотки крови собак при дирофиляриозе показал повышение количества билирубина, глобулина, хлоридов, фосфора и снижение содержания альбумина.

M.Hayasaki (1982) изучена возможность передачи антител против D.immitis от организма матери эмбриону и потомству соответственно через плаценту и молозиво. Опыты проводили на 20 суках, инвазированных дирофиляриями, 19 плодах и 57 новорожденных щенятах. Кровь и молозиво собак, кровь плодов и щенков исследовали реакцией непрямой гемагглютинации с целью обнаружения антител против D.immitis. Автором не установлены антитела против дирофилярий в крови плодов, извлеченных из матки зараженных собак. Антитела против дирофилярий пассивно передавались через молозиво щенков, начиная с момента рождения и до 2-месячного возраста. Автором отмечена зависимость уровня титра антител у щенков и сук. При повышении титра антител у сук увеличивался титр антител у щенков. Максимальный титр антител против D.immitis у щенков наблюдали в крови в первые 5-7 дней после рождения.

Признаки острого пареза описали у собаки при дирофиляриозе в возрасте 3,5 года (1982). При гематологическом исследовании был установлен лейкоцитоз, лимфопения и эозинофилия. Большое количество лейкоцитов и микрофилярий содержалось в моче. При исследовании спинномозговой жидкости установлены признаки геморрагии. При вскрытии павшей собаки в правом предсердии, желудочке и легочных артериях обнаружено 30-40 самок и самцов D.immitis. Авторы полагают, что парез у собаки вызван повышением активности дирофилярий в эпидуральном пространстве спинного мозга.

R.B.Atwell, I.B.Buoro (1983) в зависимости от степени проявления клинических признаков дирофиляриоза, вызванного D. immitis, подразделили собак на 3 группы. У собак первой группы видимых клинических признаков не наблюдали, но отмечали изменения при радиографии. Во вторую группу вошли собаки со средней степенью проявления клинических признаков, при которых у собак отмечали кашель, снижение массы тела и тяжелые изменения при радиографии. Третья группа включала собак с тяжелой степенью заболевания, проявляющейся в нарушении работы сердца, истощении, диспноэ и тяжелыми изменениями при радиографии. Исследователи обнаружили существенную разницу в количестве ретикулоцитов у собак, зараженных D. immitis и незараженных. Установлено, что индекс образования ретикулоцитов был выше у собак при тяжелом течении дирофиляриоза, особенно, без проявления микрофиляриемии. Уровень гемоглобина у собак с проявлением микрофиляриемии был ниже, чем у собак, у которых микрофилярий в крови не обнаруживали. Авторы полагают, что регенеративная анемия при дирофиляриозе собак связана с разрушением циркулирующих форменных элементов крови.

Наличие D.immitis в легочных артериях обуславливает цитотоксическое действие на эндотелий сосудов (1983). Изменения в эндотелии сосудов вызваны травмой эндотелиальных клеток D.immitis, действием их токсинов и продуктов жизнедеятельности и иммунной реакцией организма.

R.E.Thomas (1985) при анализе мочи зараженной D.immitis собаки в Великобритании установил альбуминурию.

C.A.Calvert, J.M.Losonsky (1985) описали типичный случай латентного дирофиляриоза у суки в возрасте 7 лет породы терьер, у которой отмечали кашель, затрудненное дыхание, снижение аппетита и упитанности, цианоз. При радиографии было установлено расширение легочных артерий. Дирофиляриоз сопровождался пневмонией с увеличением концентрации эозинофилов среди воспалительных клеток.

По данным C.A.Calvert, C.A.Rawlings (1986) симптомы дирофиляриоза начинают проявляться у собак при наличии у них не менее 25 взрослых дирофилярий. Паразитирование от 25 до 60 экз. D.immitis приводит к затрудненной циркуляции крови. 100 и больше дирофилярий приводят к закупорке легочных артерий и правого желудочка сердца. Сердце увеличивается в размерах, часть крови возвращается в печень и другие органы, вызывая переполнение и дегенерацию. Больные дирофиляриозом собаки быстро утомляются, кашляют. "Скрытый дирофиляриоз" имеет место у 10-67% собак.

По мнению C.H.Courtney et al. (1990) микрофилярий не выявляются у 41% зараженных дирофиляриями собак.

H.Kitagawa, Y.Sasaki, K.Ishihara (1986) считают, что наличие дирофилярий в просвете трехстворчатого клапана может явиться непосредственной причиной проявления клинических признаков заболевания и повышения внутрисосудистого гемолиза. Авторы провели опыты на 12 спонтанно зараженных дирофиляриями собаках в возрасте 3-8 лет с признаками гемоглобинурии. Дирофилярий из сердца удаляли хирургическим путем, после чего клиническое состояние собак улучшилось и резко снизилось количество гемоглобина в плазме крови. Через 20 часов после удаления дирофилярий концентрация гемоглобина достигла исходного уровня.

Снижение количества эритроцитов и гематокрита и повышение числа лейкоцитов у зараженных дирофиляриями собак в Турции отмечали в 1997г. В моче наблюдали повышенную концентрацию белка. При вскрытии двух зараженных собак микрофилярии находили в легких, печени и почках. В правом предсердии и легочных артериях обнаружили 8-11 половозрелых D.immitis.

При высокой зараженности собак дирофилярии мигрируют из легочной артерии в правый желудочек, правое предсердие и полую вену. Это может привести к так называемому "синдрому полой вены", который выражается во внутрисосудистом гемолизе и шоке. При синдроме полой вены дирофилярии могут блокировать артерии, повышая давление в кровеносных сосудах печени, и в конечном итоге приводят к гемолизу, анемии, гемоглобинурии и билирубинемии.

По мнению G.Baneth et al. (2000) клинические признаки дирофиляриоза собак, вызванного D.repens, проявляются в форме утолщений кожи, подкожных узелков и дерматитов.

Повышение количества эозинофилов в периферической крови может служить одним из диагностических признаков дирофиляриоза (ДА.И.Мазуркевич и др., 2000).

А.Мазуркевич и др. (2001) выделили 4 основных симптома дирофиляриоза: интоксикационный, кожный, псевдоопухолевый и правожелудочковую недостаточность. Наиболее характерным симптомом авторы считают кожный, проявляющийся в виде облысения, припухлостей, множественных пустул, содержащих серозный гной.

Данные по патогенному воздействию дирофилярии на организм собак весьма противоречивы, что, по-видимому, объясняется видом дирофилярии, степенью интенсивности инвазии, состоянием организма животных и другими факторами. Авторами монографии изучено влияние дирофилярии разных видов на физиологические, гематологические и биохимические показатели собак, полагая, что D.immitis являются наиболее патогенными, так как паразитируют в сердце (Д.Р.Архипова, 2003). Опыты проводили на 5 собаках, спонтанно инвазироваыных D.immitis, 5 собаках, инвазированных D.repens и 10 собаках, свободных от дирофилярии и другой инвазии. У собак ежедневно в течение 3-х дней брали пробы крови для гематологических и биохимических исследований. Кроме того, у собак учитывали общие клинические показатели по общепринятым методам.

Клинические наблюдения за инвазированными собаками показали, что дирофиляриоз у подопытных животных протекал, в основном, без видимых симптомов болезни. Полученные результаты на собаках, инвазированных D.immitis, свидетельствуют о некоторых изменениях в показателях крови. Нами отмечено существенное снижение содержания гемоглобина и скорости оседания эритроцитов. Количество эритроцитов также снижалось. Изменения произошли и в лейкоцитарной формуле инвазированных D.immitis собак. Содержание лимфоцитов повысилось с 27% у контрольных животных до 32,7% у инвазированных, а количество сегментоядерных нейтрофилов незначительно снизилось. Количество эозинофилов увеличилось более чем в 2 раза. Указанные изменения в крови свидетельствуют о наличии патологических процессов в организме собак, вызванных D.immitis.

D.repens, паразитируя в организме собак, вызывают менее выраженные изменения в показателях крови, по сравнению с D.immitis. Показатели крови собак, инвазированных D.repens, были практически на уровне показателей животных, свободных от инвазии.

Об анемии, вызванной D.immitis, сообщали также K.Ishihara et al. (1978), R.B.Atwell, I.B.Buoro (1983) и другие исследователи, которые полагали, что регенеративная анемия при дирофиляриозе собак связана с разрушением циркулирующих форменных элементов крови и не обусловлена нарушением функции костного мозга. По их мнению количество циркулирующих микрофилярий в крови не влияет на степень течения дирофиляриоза.

О повышении содержания билирубина, мочевины и активности кислой фосфатазы при дирофиляриозе собак, вызванном D.repens, сообщали А.И.Мазуркевич и др. (2000).
Полученные авторами монографии сравнительные результаты по влиянию D.immitis и D.repens на организм собак согласуются с данными литературы, указывающими на то, что более патогенным является вид D.immitis.

(продолжение следует)

 Отправлено: 20.03.07 13:38. Заголовок: Re:

Диагностика дирофиляриоза

Прямое исследование крови
Диагностика дирофиляриоза традиционно базируется на обнаружении и идентификации микрофилярий в крови различными методами. Также необходимо принимать во внимание историю болезни и выраженность клинических признаков.

Одним из самых простых и быстрых методов обнаружения микрофилярий является метод прямого исследования мазка крови при малом увеличении микроскопа. Движущиеся микрофилярий хорошо заметны в поле зрения. Иногда их трудно увидеть из-за эритроцитов. Однако этот метод приемлем, если в крови есть микрофилярии. При "скрытой" форме дирофиляриоза и низкой интенсивности инвазии этот метод бессмыслен. Недостатком этого метода также является невозможность провести идентификацию микрофилярий по видам.

Для диагностики дирофиляриоза можно использовать метод исследования сыворотки крови. Пробу крови отстаивают, каплю сыворотки помещают на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют под малым увеличением микроскопа. Живые микрофилярий при большой концентрации переходят в сыворотку и их легко обнаруживают, так как в сыворотке нет эритроцитов. Недостатком этого метода является невозможность выявить низкую интенсивность инвазии.

Методы концентрации
Центрифугирование крови позволяет максимально сконцентрировать микрофилярии в небольшом объеме.
J.I.Knott (1939) предложил метод, сущность которого заключается в том, что в пробирку с 1 мл свежей крови добавляется 10 мл 2%-ного раствора формалина и смесь центрифугируется в течение 5 минут при 1000-1500 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость удаляют, осадок смешивают в равных количествах с 0,1%-ным раствором метиленовой сини. Из окрашенного осадка делают влажный мазок и исследуют под микроскопом.

G.Burch, H.E.Blair (1951) в пробирку с 2 мл цельной крови добавляли 1 мл 2%-ного раствора сапонина и центрифугировали 60 сек. при 4500 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость сливали, осадок исследовали под микроскопом. Этот метод более чувствителен в отношении выявления слабой интенсивности инвазии.

W.L.Newton, W.H.Wright (1956) усовершенствовали метод J.Knott (1939). 1 мл цельной крови смешивали с 10 мл 2%-ного раствора формалина и смесь центрифугировали в течение 5 минут при 1500 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость сливали, осадок смешивали в равных частях с раствором метиленового синего. 1 каплю окрашенного осадка помещали на предметное стекло, накрывали покровным и исследовали под микроскопом. Этот метод имеет ряд преимуществ перед другими: все микрофилярии концентрируются в небольшом количестве осадка, состоящего, в основном, из лейкоцитов и разрушенных гемолизированных эритроцитов. Это особенно важно при установлении заражения дирофиляриями при слабой инвазии. Данный метод достаточно надежный, при котором легко измерить длину и ширину микрофилярий.

O.W.Schalm, N.C.Jain (1966) предложили метод выявления микрофилярий гематокритным методом, при котором кровь помещают в стандартные микрогематокритные пробирки и центрифугируют в течение 5 минут при 8500 обор./мин. После центрифугирования капиллярные трубки помещают горизонтально на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Микрофилярии совершают активные волнообразные движения. При применении данного метода можно исследовать маленький объем крови и невозможно дифференцировать микрофилярий до вида. Авторы описали метод подсчета микрофилярий, используя модифицированный метод Knott. Определенный объем окрашенного осадка, полученный при использовании этого метода, помещают на предметное стекло, закрывают покровным, исследуют под микроскопом и далее подсчитывают. Однако этот метод дает приблизительное количество микрофилярий в 1 мл крови.

J.J.Mines (1967) предложил использовать для подсчета микрофилярий в крови камеру H.M.Gordon, H.V.Whitlock (1939). При использовании этого метода 0,5 мл цельной крови лизируют добавлением 7 мл 0,04%-ного раствора гидрооксида аммония. Камеру заполняют кровью и исследуют под микроскопом, микрофилярий подсчитывают. Затем количество подсчитанных микрофилярий умножают на 100 и получают число микрофилярий в 1 мл крови.

На Филиппинах ветеринарными специалистами для диагностики дирофиляриоза собак используется метод, предложенный I.Ohishi, S.Kobayashi (1961). 1 мл крови помещают в центрифужную пробирку с 9 мл Ohishi раствора, перемешивают и центрифугируют при 1500 обор./мин. в течение 5 минут. Надосадочную жидкость удаляют, осадок переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Ohishi раствор состоит из 50 мл метиленовой сини, 2 г цитрата натрия, 50 мл ацетона и 900 мл дистиллированной воды.

Модификацию метода O.W.Schalm, N.C.Jain (1966) предложил Y.D.Collins (1971). Микрогематокриты готовили в капиллярных трубках путем центрифугирования в течение 4-х минут в микрогематокритной центрифуге. Капиллярные трубки держали при температуре 17°С в вертикальном положении и исследовали в течение 21 дня. Их помещали горизонтально на чистое предметное стекло и исследовали светлый слой кровяного сгустка на наличие микрофилярий. Наблюдали за тем, как микрофилярий появлялись в целлюлярном светлом слое кровяного сгустка, чтобы проникнуть в слой плазмы в пределах секундной экспозиции в направленном пучке света. Значительная подвижность наблюдалась вплоть до 21 дня после сбора образцов крови. Удобство данного метода заключается в том, что исследование светлого кровяного сгустка может осуществляться на микрогематокрите, используемом для определения объема уплотненных клеток, пробы исследуются за короткий период, на одном предметном стекле можно исследовать сразу 5 проб. Особенно важно, что описанный метод пригоден при исследовании проб крови от животных, находящихся в карантине, когда при постановке в карантин пробы крови берут, а исследовать их можно в течение длительного периода.

Методы фильтрации
Метод фильтрации через миллипоровые фильтры предложен J.P.Wylie (1970). В шприц набирают 1 мл крови, смешивают с гепарином и добавляют 10 мл лизированного раствора. Полученный лизированный кровяной раствор из шприца пропускают через миллипоровый фильтр размером пор 8 ?. Затем через фильтр медленно пропускают 5-10 мл раствора толуидинового синего. Далее фильтр промывают 10 мл воды, отсоединяют от держателя и исследуют под микроскопом. Окрашенные микрофилярий можно дифференциировать. Этот метод не требует использования центрифуги.

В.Г.Супряга, А.И.Андреенковым (1978) для медицинской практики предложена методика диагностики филяриатозов у лиц с низкой плотностью микрофилярий в крови. Авторами разработана модификация, с помощью которой микрофилярий обнаруживают на окрашенных ультрафильтрах, через которые пропускают под вакуумом гемолизированную кровь.

Количественная диагностика
В химиотерапевтических опытах необходимо проводить количественное выявление микрофилярий.

J.R.Lindsey (1965) для подсчета микрофилярий предложил метод, при котором кровь набирают в шприц с гепарином, смешивают. Затем делают 3 мазка (2 мл), высушивают их и окрашивают раствором Гимза. Если в мазке обнаруживают, в среднем, менее 1 микрофилярии, то считают, что в 1 мл цельной крови меньше 50 микрофилярий.

Авторами монографии (Д.Р.Архипова, И.А.Архипов, 2004) предложен количественный метод прижизненной диагностики дирофиляриоза собак с использованием меланжера и счетной камеры Фукс-Розенталя. Кровь берут из ушной вены в смесительную пипетку (меланжер) до метки 1 и до метки II заполняют раствором, состоящим из ледяной уксусной кислоты, раствора Фуксина и дистиллированной воды в соотношении 3:4:93. Для равномерного смешивания меланжер с кровью и раствором кладут на вибратор на 2-3 минуты. К чистой и сухой камере Фукс-Розенталя притирают покровное стекло до появления так называемых колец Ньютона. Затем раствор в меланжере встряхивают и каплю (но не первую) наносят на среднюю часть пластинки камеры и подсчитывают количество микрофилярий под микроскопом во всех квадратах. Полученное количество микрофилярий делят на степень разбавления (10) и емкость камеры (3,2 куб.мм) и умножают на 20. Получают количество микрофилярий в 20 куб.мм крови. Метод может применяться для количественной прижизненной диагностики дирофиляриоза собак и оценки эффективности средств борьбы и профилактики заболевания, определения интенсивности инвазии в разных зонах, изучения возрастной и сезонной динамик дирофиляриоза, плодовитости самок дирофилярий, а также при подборе групп аналогов животных.

Иммунологические методы
При диагностике дирофиляриоза собак можно также использовать и иммунологические методы, при использовании которых в крови выявляются антитела против микрофилярий и взрослых дирофилярий. Это иммунофлуоресцентный (IFA) и энзим-иммуносорбентный (ELISA) методы. Этими методами можно выявить препатентную стадию заболевания и неполовозрелых дирофилярий в сердце. Позитивные результаты применения этих методов могут быть получены через 6 месяцев у собак, которых лечили против дирофиляриоза. В крови еще остаются остаточные антитела к дирофиляриям.

В опытах на 28 собаках с признаками патентного и 6 - латентного дирофиляриоза изучена эффективность энзимиммуносорбентного метода диагностики (R.G.Scholtens, S.Patton, 1983). Сыворотку крови собаки сследовали энзимиммуносорбентным методом с использованием антигена, приготовленного из D.immitis. Средний геометрический титр антител оказался равным 30 у незараженных собак и 2896 у собак с признаками латентного дирофиляриоза без проявления микрофиляриемии, но с наличием изменений в легких, выявленных методом радиографии. Титр антител 28 собак при патентном дирофиляриозе составил 122. Авторами установлено, что титр антител у собак при латентном дирофиляриозе оказался значительно выше титра антител незараженных собак и собак с признаками патентной инвазии.

I.BJ.Buoro, R.B.Atwell (1983) сообщают о 100%-ной эффективности иммуноферментного метода для диагностики латентного дирофиляриоза собак. Тест показал положительные результаты в 88% случаев у собак с наличием микрофилярий в крови.

Новый диагностический тест с использованием моноклональных антител предложили использовать в диагностике дирофиляриоза D.B.Rylatt et al. (1984). Этот тест является наиболее чувствительным и специфичным, позволяет установить диагноз при латентном дирофиляриозе и предотвращает возможность перекрестной реакции у собак, зараженных Dipetalonema reconditum.

При использовании иммунологических методов диагностики возможна перекрестная реакция к антигенам других паразитов, таких как D.reconditum, токсокары и трихоцефалы (R.J.Wilkins, D.Ciurea, 1985).

T.E.Martin, G.H.Collins (1985) сравнивали эффективность различных методов ELISA в диагностике дирофиляриоза собак. "Dirotect" выявлял 80% из 30 случаев латентного дирофиляриоза и 95% - из 20 собак с наличием микрофилярий в крови, однако давал положительные реакции в 47% случаев у собак, свободных от данной инвазии.

R.B.Grieve et al. (1986) испытали эффективность энзимиммуносорбентного метода и метода непрямой иммунофлуоресценции при диагностике дирофиляриоза. Количество собак, положительно реагирующих при использовании ELISA, увеличивалось с возрастом собак и коррелировало со степенью инвазированности взрослыми D.immitis, обнаруженными при вскрытии. Эффективность метода непрямой иммунофлуоресценции была значительно ниже. В группе собак в возрасте 12 мес. эффект метода ELISA составил 65%.

Clq-ELISA показал высокий диагностический эффект в опытах K.Matsumura et al. (1986). Специфичность Clq-ELISA была изучена при различном уровне иммуноглобулинов в крови. Концентрация иммуноглобулина G в мл сыворотки крови зараженных собак с микрофиляриемией и без наличия микрофиляриемии составила соответственно 130,5 и 219,7 мкг/мл. У незараженных щенков и взрослых собак уровень иммуноглобулина G оказался равным соответственно 6,0 и 37,5 мкг/мл.

Энзимиммуносорбентный метод "Filarochek" (J.F.Levine et al., 1988) оказался наиболее эффективным при диагностике дирофиляриоза по сравнению с исследованием крови методом Knott и посмертным вскрытием.
L.C.Wang (1997) считает метод ELISA намного чувствительнее метода Knott. При использовании метода ELISA автор установил 55%-ную зараженность собак D.immitis на Тайване.

C.G.N.Fernandes et al. (2000) изучили распространение дирофиляриоза среди собак города Гуибы (Бразилия) исследованием крови усовершенствованным методом Knott и серологическим методом иммуноблотинга. Всего исследовано 822 пробы крови. При применении иммуноблотинга антитела против D.immitis выявлены у 11,81, а усовершенствованным методом Knott микрофилярий обнаружены в 0,41% исследованных проб. Методом иммуноблотинга получен 11,27% -ный положительный результат в пробах крови, в которых ранее микрофилярий усовершенствованным методом Knott не находили.

W.Tarello (2001) испытал эффективность метода концентрации (Difil-test) и серологического теста на собаках из эндемичных и неэндемичных по дирофиляриозу районов Италии. Метод концентрации показал высокую эффективность при диагностике дирофиляриоза собак из разных районов. Однако при использовании серологического теста получены отрицательные результаты на собаках из неэндемичных районов. Таким образом использование серологических антигенов при диагностике дирофиляриоза не эффективно при слабой степени инвазии, когда в организме собаки паразитируют дирофилярии одного пола.

Радиография
Радиографию можно использовать при диагностике скрытой формы дирофиляриоза (J.M.Losonsky, D.E.Thrall, R.E.Lewis, 1983). Для дирофиляриоза наиболее характерны изменения в правом желудочке и артериях правой краниальной доли легкого, выражающиеся в увеличении желудочка и диаметра артерий.

В опытах J.D.Hoskins et al. (1984) наибольшие изменения при дирофиляриозе, вызванном D.immitis, также проявлялись в виде расширения правого желудочка сердца и увеличения размеров легочных артерий паренхимы легких.

L.T.Glickrnan et al. (1984) считают, что лучшего результата при диагностике дирофиляриоза собак можно достичь при одновременном: исследовании крови методом Knott, радиографии грудной клетки, использовании серологических тестов и учета клинических признаков заболевания.

Методы дифференциальной диагностики
При диагностике дирофиляриоза необходимо дифференцировать микрофилярии до вида. Микрофилярии D.immitis и D.repens можно дифференцировать, учитывая их внутреннее строение.

Для дифференциации микрофилярий S.Pampiglione, T.G.Canestri, F.Rivasi (1995) пробы крови фиксировали в 2%-ном растворе формалина. Микрофилярий D.immitis имели длину 262-338, ширину 4-6,2 микрон, их дифференцируют от Dipetalonema reconditum, которые короче и тоньше (241-287 х 3,8-5 микрон; C.F.Schrey, 1996) и часто изгибаются.

Микрофилярий D.repens крупнее D.immitis 270-379 микрон длиной и шириной 6-8,3 микрон. Головной конец микрофилярий D.repens имеет округлую форму и прозрачный цвет, у микрофилярий D.immitis - коническую форму и темный цвет (S.Pampiglione, T.G.Canestri, F.Rivasi, 1995).

G.Favia et al. (1996) предлагают дифференцировать D.immitis и D.repens, используя полимеразную цепную реакцию.

Микрофилярий D.immitis и D.repens можно дифференцировать по форме головного и хвостового концов (G.Traldi, 1987). Головной конец микрофилярий D.repens имеет округлую форму, он короткий и прозрачный, а у микрофилярий D.immitis - конической формы и темного цвета.

Другие методы диагностики
В некоторых случаях при диагностике дирофиляриоза, вызванного D.immitis, можно использовать рентгенографию грудной клетки, эхокардиографию и электрокардиографию, которые позволяют оценить интенсивность инвазии по изменениям внутренних органов. При применении этих методов можно оценить изменения в легочных артериях (расширение, демаркацию, повышенное давление), легких (инфильтрацию), сердце (тахикардию, кардиомегалию правого желудочка и его гипертрофию, недостаточность трехстворчатого клапана, расширение правого желудочка и предсердия).

Сравнительная эффективность диагностических методов
S.Kume (1970) считает, что при исследовании прямого мазка выявляется только 25% зараженных дирофиляриями собак. Методы концентрации значительно эффективнее. Автор сравнил эффективность метода концентрации и исследования мазка в разные сезоны года. И зимой, и летом эффективность метода концентрации микрофилярий составила 100%, тогда как методом мазка соответственно 75,5 и 93,5%.

При сравнении эффективности четырех диагностических тестов, прямого влажного мазка, модифицированного метода Knott, метода концентрации и капиллярной седиментации, J.P.Wylie (1970) установлена наибольшая точность модифицированного метода Knott и метода фильтрации. При использовании метода концентрации на исследование одной пробы крови затрачивалось около 6, при методе фильтрации - меньше 1 мин. Преимуществом метода фильтрации J.P.Wylie считает возможность исследовать до 2-3 мл крови, в то время как при применении модифицированного метода Knott исследуют 1 мл.

Наиболее точным методом выявления микрофилярий в периферической крови N.H.Altman (1972) считает метод использования миллипорового фильтра. Автором не выявлено разницы в количестве выявляемых микрофилярий при взятии крови из ушной, головной вены и латеральной вены голени.

A.D.J.Watson, F.L.Testoni, W.L.Porges (1973) провели опыт по сравнению длины микрофилярий, выявленных модифицированным методом Knott и методом фильтрации. Ими установлено, что при использовании метода фильтрации микрофилярий D.immitis становятся значительно короче (256,7 в сравнении с 301,3 микрон при исследовании модифицированным методом Knott).

По данным R.S.Desowitz, B.A.Southgate (1973) при исследовании методом мембранной фильтрации 1 мл крови, взятой из вены, процент выявляемое микрофилярий возрастает в 1,5-3 раза по сравнению с результатами обследования методом толстой капли.

J.D.Kelly (1973) проанализировал эффективность разных методов диагностики дирофиляриоза собак и пришел к выводу, что наиболее успешными являются усовершенствованный метод Knott и метод фильтрации.

E.T.Carlos, L.L.Magaway, F.T.Calalay (1979) сравнили эффективность модифицированного метода Knott и метода I.Ohishi, S.Kobayashi (1961) при исследовании 600 проб крови собак. 348 и 370 проб крови, исследованных соответственно модифицированным методом Knott и методом Ohishi, показали положительные результаты. Преимуществами метода Ohishi является вязкая структура седимента, не позволяющая ему растекаться по предметному стеклу, и более темная окраска микрофилярий.

Для диагностики дирофиляриоза А.А.Гаврилов (1976) использовал метод Knott в модификации J.R.Lindsey (1965) с целью подсчета числа микрофилярий в периферической крови. 1 мл крови смешивали с 10 мл 2%-ного раствора формалина. Смесь центрифугировали в течение 5-8 мин. при 1500 об./мин. Надосадочную жидкость сливали, а осадок смешивали с равным объемом метиленовой сини в разведении 1:1000. Микрофилярий размером 0,22-0,31 х 0,006-0,008 мм обнаруживали в мазках крови (3-27 в поле зрения) и паренхиматозных органах: в легких - 2-16, печени - 1-9, селезенке - 1-6 экз. в поле зрения (Об. 3,7 или 9 х 12,5).

D.J.Lahitte, B.Davoust, P.Dorchies (1986) провели сравнительное изучение 5 методов обнаружения микрофилярий в крови собак: с помощью фиксированного мазка, толстой капли, раздавленной капли, центрифугированием крови и ее фильтрацией. В 33, 49, 49, 75 и 75 случаях соответственно находили микрофилярий D.immitis. Авторы рекомендуют при диагностике дирофиляриоза использовать методы центрифугирования и фильтрации.

C.A.Calvert (1987) сравнил эффективность диагностических тестов выявления микрофилярий в крови инвазированных собак: метода прямого исследования мазка, концентрации, гематокритной седиментации, Knott и методом ELISA. Метод концентрации микрофилярий оказался на 10-15% чувствительнее, чем метод прямого мазка. Чувствительность метода ELISA составила 85-90%.

M.Maitini et al. (1991) сравнили эффективность различных методов диагностики дирофиляриоза: мазка крови, модифицированного метода Knott и новой модификации метода Knott при исследовании проб крови от 329 собак на севере Италии. В качестве контроля использовали метод фильтрации, с помощью которого в 160 пробах обнаружены микрофилярий D.immitis, в 2-х - D.repens и 1-й - микрофилярий обоих видов. Установлена 88,3; 91,0 и 91,8%-ная чувствительность соответственно метода мазка, модифицированного метода Knott и новой модификации метода Knott. Модифицированные методы Knott обладают 100%-ной эффективностью.

При исследовании 94 проб крови от бездомных собак в Мехико B.C.Garfias et al. (2001) сравнили 3 метода диагностики дирофиляриоза: метод исследования в толстом слое, мазка крови и прямого исследования и установили соответственно 100; 82,6 и 30,4%-ную их эффективность.

При прямом исследовании крови микрофилярий выявлялись в 80,9% из 204 проб с микрофиляриями в крови, выявленными модифицированным методом Knott. Установлена 100%-ная эффективность выявления микрофилярий прямым исследованием крови при интенсивности инвазии выше 50 микрофилярий в 1 мл и 44,3%-ная - при наличии в 1 мл крови менее 50 микрофилярий (C.H.Courtney, Q.Y.Zeng, 2001).

С.В.Величко и др. (2001) считают наиболее результативными методами диагностики дирофиляриоза модифицированный метод Knott и метод обогащенного мазка.

Влияние различных факторов на диагностику дирофиляриоза

Суточная периодичность микрофиляриемии
Данные по суточной периодичности микрофилярий в крови собак весьма противоречивы. Механизм периодичности микрофилярий пытались объяснить многие ученые. Существует 2 доминирующие гипотезы по поводу объяснения этого феномена: 1 цикличность воспроизводительной способности самок филярий; 2 - миграция личинок из кровеносной системы хозяина в органы и ткани (D.Katamine, 1972). Периодичность микрофиляриемии может быть выражена по-разному в разных природно-климатических условиях.

Так, по утверждениям Э.И.Шлейхера (1948) в условиях Узбекистана в течение суток периодичности микрофиляриемии у собак нет!

J.Euzeby, B.Laine (1951) во Франции наименьшее количество микрофилярий в крови обнаружили в 8 часов утра, наибольшее - в 8 часов вечера.

В опытах W.A.F.Webber, F.Hawking (1955) установлена суточная периодичность микрофилярий D.repens и D.immitis. Наименьшее количество микрофилярий составляло 20-40% от наибольшего у D.repens и 5-20% у D.immitis. Максимальное и минимальное количество микрофилярий D.repens приходилось соответственно на середину ночи и середину дня, а у D.immitis - на 6 часов вечера и 6 часов утра. По данным авторов цикл развития D.repens адаптировался к виду комаров, которые активно нападают в течение ночи, а D.immitis - после полудня и вечером.

S.Kume (1960) сравнивал концентрацию микрофилярий D.immitis в легочных сосудах собак в дневное и ночное время. Количество микрофилярий в легочных сосудах было в 593 раза больше, чем в периферической крови в дневное время и в 28 раз - ночью.

M.S.Tongson, F.R.Romero (1962), S.Kume, I.Oishi (1970) установили цикличность микрофиляриемии. Наибольшее количество микрофилярий D.immitis в крови собак авторы установили в период с 19.45 вечера до 12.40 ночи, минимальное - с 6.50 утра до 16.55 дня.

В Америке наибольшее число микрофилярий отмечено в крови собак ночью (F.A.Tarplee, R.E.Bradley, 1982).
Несколько отличаются данные R.B.Grieve, S.Lauria (1983). Авторами установлена наибольшая плотность микрофилярий в крови в период максимальной активности собак, т.е. в 12-16 часов.

D.Abraham, R.B.Grieve, J.A.Oaks (1990) также утверждают о наличии периодичности в численности циркулирующих в крови микрофилярий в течение дня. Максимальное количество микрофилярий в крови авторы обнаруживали после обеда.

Периодичность микрофилярий D.immitis в крови зараженных собак изучал в условиях Танзании Y.G.Matola (1991). Однако его данные диаметрально противоположны результатам предыдущих исследователей: максимальное количество микрофилярий в крови находили в 11 часов утра, минимальное - в 10 часов вечера.

В условиях Кореи цикличность микрофиляриемии у собак, зараженных D.immitis, изучали J.K.Rhee, S.S.Yang, H.C.Kim (1998). Наибольшее количество микрофилярий в крови зараженных собак находили в 9 часов вечера, минимальное - в 11 часов утра.

В Иране пик микрофилярий D.immitis в крови спонтанно инвазированных собак B.Meshgi, A.Eslami, J.Ashrafi (2001) отмечали в 1 час ночи, минимальное количество - в 11 часов.

В результате исследований (Д.Р.Архипова, И.А.Архипов, 2004) получена существенная разница в количестве обнаруженных микрофилярий D.immitis и D.repens в разное время суток. Максимальное количество микрофилярий в крови собак, инвазированных D.immitis, обнаруживали в вечернее время, а именно в период с 19 до 21 часа. Утром количество микрофилярий D.immitis в крови собак значительно снижалось и составило около 10% от их количества в вечернее время. Среднее количество микрофилярий D.immitis в 20 куб.мм периферической крови собак составило утром 19,2+2,0, днем 38,4+4,5, вечером 227,0±14,2 и ночью 108,6±11,4 экз.

Разница между максимальным и минимальным количеством микрофилярий в крови собак была более выражена при дирофиляриозе, вызванном D.immitis. Так, утром количество микрофилярий D.immitis в 20 куб.мм крови собак составило 8,5% от этого показателя в вечернее время, а при дирофиляриозе, вызванном D.repens, количество микрофилярий в крови собак ночью было на 71,0% больше по сравнению с показателем в дневное время.

Таким образом, по данным литературы и собственным исследованиям можно утверждать, что периодичность микрофиляриемии в течение суток существует и для установления диагноза при дирофиляриозе пробы крови для исследования целесообразнее брать в вечерне-ночное время.


Сезонная периодичность микрофиляриемии
Имеются данные о существовании сезонной периодичности микрофиляриемии у зараженных дирофиляриями собак.

Так, Э.И.Шлейхером (1948) сезонная периодичность в появлении микрофилярий D.repens в периферической крови установлена у собак в Узбекистане. Резкое уменьшение количества микрофилярий наступало дважды в те месяцы, когда обычно отмечали значительное понижение температуры - первый раз в декабре и второй раз - в ноябре.

По данным J.W.Ward, M.A.Franklin (1953) наибольшее число микрофилярий D.immitis выявляли в крови собак в марте-апреле.

D.E.Eyles et al. (1954) провели исследование крови и вскрытие 204 собак Мемфиса (США) и установили, что наименьшее количество микрофилярий в крови и взрослых D.immitis в сердце и легочных артериях обнаружено в зимние месяцы, чем в осенние.

A.D.J.Watson, W.L.Porges, F.J.Testoni (1973) отмечали сезонность дирофиляриоза в Австралии. Наибольшее количество микрофилярий в крови собак авторы установили в августе-ноябре, наименьшее - в феврале-мае.
Сезонную периодичность с пиком микрофилярий в крови в летние месяцы Y.Aoki (1971) связывает с повышением температуры окружающей среды, T.Masuya (1976) объясняет увеличением светового дня, а Е.М.Church, J.R.Georgi, D.S.Robson (1976) выдвинули гипотезу о влиянии эмоционального состояния собак на цикличность микрофилярий в крови.

Количество микрофилярий в 1 мл крови у собак, исследованных А.А.Гавриловым (1976), колебалось в зависимости от сезона года ( в среднем): 1 квартал - 3200,0; П кв. - 5678,5; Ш кв. - 22657,1 и 1У кв. - 10547,8 экз.

Т.П.Худавердиев (1976), Т.П.Худавердиев и Ш.М.Джафаров (1979) отмечали сезонность в распространении дирофиляриоза собак в Нахичеванской АССР. Авторы установили максимальную зараженность собак дирофиляриями D.repens в июне и июле в низменной зоне республики, где расположены обширные постоянные заболоченные участки.

F.Mizuno, T.Higashio, T.Matsumura (1981) выявили сезонную периодичность микрофилярий в крови собак в окрестностях г.Токио. Весной, летом, осенью и зимой микрофилярий D.immitis обнаруживали соответственно у 28,8; 37,1; 19,5 и 9,2% собак.

В условиях теплого климата побережья залива в США (шт. Флорида, Бартон, Луизиана и др.) передача дирофиляриозной инвазии через комаров зависит от сезона года. При вскрытии 109597 экз. комарор нескольких родов и видов микрофилярий D.immitis не находили в декабре, январе, феврале и марте (K.J.Watts et al., 2001).

За 1998-2000 гг. Н.С.Василик (2001) проанализировала 66 случаев дирофиляриоза собак в регионе г.Киева и близлежащих областей и установила максимальную зараженность собак в июле-августе.

Результаты изучения сезонной периодичности микрофилярий в крови собак при дирофиляриозе в условиях Калмыкии свидетельствуют о существенной разнице в количестве микрофилярий как D.immitis, так и D.repens в крови животных в разные сезоны года (Д.Р.Архипова, 2003). Максимальное количество микрофилярий D.immitis и D.repens в крови собак обнаруживали летом. Осенью микрофиляриемия снижалась у собак, зараженных D.immitis, на 69,8, а инвазированных D.repens - на 67,2%.

Зимой микрофилярий D.immitis и D.repens в крови собак находили в незначительном количестве и не у всех зараженных собак. Количество микрофилярий зимой снижалось на 99,7% по сравнению с их уровнем в летний период. Весной (апрель) микрофиляриемия у собак снова повышалась, достигая более 55,0% от летнего уровня. Среднее количество микрофилярий D.immitis в 20 куб.мм крови собак составило весной (апрель) 82,6±8,3, летом (июль) 227,0±9,5, осенью (октябрь) 68,6±5,5 и зимой (январь) 11,2±2,7 экз. Среднее количество микрофилярий D.repens в этом объеме крови собак было равным в апреле, июле, октябре и январе соответственно 70,0±6,7, 153,8±9,6, 50,4±4,1 и 14,0±3,2экз.

Таким образом, микрофиляриемия повышается в летние месяцы и снижается в зимние, т.е. наибольшее количество микрофилярий в крови отмечается в теплые месяцы, когда максимальна численность комаров, являющихся промежуточными хозяевами дирофилярий, что позволяет в природе осуществить передачу и дальнейшее распространение инвазии. В связи с этим при дирофиляриозе пробы крови для плановых исследований целесообразно брать в летний период.


Провокация микрофиляриемии
Наличие суточной и сезонной диапауз создает трудности для обнаружения микрофилярий в крови. С этой целью можно использовать средства, провоцирующие микрофиляриемию.
I.Oishi, S.Kume (1957) установили провоцирующее действие на микрофилярий диэтилкарбамазина в дозе 2,0 мг/кг при исследовании крови днем. Через 15 мин. после введения диэтилкарбамазина в крови отмечали максимальное количество микрофилярий. По данным D.Katamine (1959) и H.Fukamachi (1960) пилокарпин и ацетилхолин обладают провоцирующим действием на микрофилярий. При введении этих препаратов наблюдается внезапный подъем количества микрофилярий в крови собак, которое через час опять снижается. Аналогичные результаты получены I.Sanger, G.Lammler (1978) в отношении диэтилкарбамазина.

Авторами монографии, в качестве средства, провоцирующего микрофиляриемию, испытан дексаметазон на 5 собаках, экспериментально инвазированных D.repens (Д.Р.Архипова, 2003). Дексаметазон в форме инъекционного раствора вводили собакам внутримышечно в дозе 4 мг на животное. До и через 0,5; 1; 2 и 3 часа после введения дексазона у собак брали пробы крови для исследования и учета количества микрофилярий в 20 куб.мм крови. Отмечено существенное повышение концентрации микрофилярий в крови собак после его введения, особенно, в первые 30-60 минут. В последующие сроки исследований количество микрофилярий в крови значительно снижалось. У животных контрольной группы, не получавших препарат, концентрация микрофилярий в течение опыта существенно не изменялась.

Количество микрофилярий в 20 куб.мм крови собак, инвазированных D.repens, составило до введения дексаметазона 153,2±7,6 экз. и через 0,5; 1; 2 и 3 часа 268,8±21,4; 262,4±17,0; 203,0±15,6 и 164,8±14,2 экз. соответственно.

Таким образом, использование дексаметазона в дозе 4 мг на голову вызывает провокацию микрофиляриемии у собак в первые 60 минут после его введения, что позволяет в большем количестве выявлять микрофилярий в крови и более эффективно установить диагноз, особенно, при слабой интенсивности инвазии или в период сезонной диапаузы (зимой) или суточной периодичности (днем).

Терапия дирофиляриоза

Макрофилярициды
В настоящее время существует 2 препарата, одобренные FDA (Всемирная организация по кормам при ООН) для лечения дирофиляриоза. Оба препарата - соединения мышьяка: тиацетарсамид натрия (капарсолат, "Мериал") и меларсомин дигидрохлорид (иммитицид, "Мериал").

Тиацетарсамид натрия успешно применяли при дирофиляриозе с умеренно выраженными признаками в дозе 0,22 мл/кг внутривенно 2 раза в день в течение 2 дней. При нарушениях дыхания и сердечной деятельности эффект препарата снижался (С. H.Carlisle, 1970).

В опытах M.T.Sudermann, T.M.Craig (1984) тиацетарсамид натрия проявил 100%-ный эффект против взрослых дирофилярий в дозе 2,2 мг/кг внутривенно 2 раза в день в течение 2 дней.

По безопасности и эффективности применения меларсомин дигидрохлорид (иммитицид) превосходит тиацетарсамид (J.P.Raynaud, 1990; D.H. Knight, 1992). Меларсомин в дозе 2,5 мг/кг дважды в день сохранялся в организме в 5 раз дольше, чем тиацетарсамид (A.Vezzoni, C.Genchi, J.-P.Raynaud, 1992). По данным этих авторов, при испытании меларсомина на 382 собаках, токсическое действие на печень не отмечено ни у одной, тогда как при применении тиацетарсамида у 15-30% собак наблюдали гепаторенальную токсичность. Однократное и двукратное применение меларсомина в дозе 2,5 мг/кг действует губительно соответственно на 50 и 96% дирофилярий. Наиболее частые побочные явления при применении меларсомина заключались в проявлении воспалительной реакции на месте введения.

О результатах сравнительного испытания тиацетарсамида и меларсомина при дирофиляриозе собак сообщал J.P.Raynaud (1992). Оба препарата автор испытал при разной степени зараженности собак. В предварительном опыте на экспериментально зараженных собаках испытан меларсомин в дозе 2,5 мг/кг два раза с интервалом 24 часа при внутримышечном введении. Для дальнейших испытаний автор предложил применять препарат в дозе 2,2 мг/кг 2 раза с интервалом 3 часа с учетом данных фармакокинетики меларсомина. Рекомендуется применять меларсомин по специально адаптированной программе с учетом клинического состояния заболевших собак и индекса безопасности препарата, равного 2,5-3.

Тиацетарсамид является гепатотоксичным и даже нефротоксичным препаратом в терапевтической дозе. Эти препараты отличаются по эффективности. Меларсомин эффективен как против взрослых, так и личинок 5-й стадии, т.е. он активен против 7 и 4-месячных дирофилярий. Тиацетарсамид оказывает губительное действие только на взрослые дирофилярий, начиная с 7 месяцев. Клинические испытания показали, что меларсомин является эффективным, относительно безопасным и удобным в применении препаратом (внутримышечно). Тактическое применение меларсомина целесообразно проводить в дозе 2,2 мг/кг дважды с интервалом 3 часа 2 раза в год в середине августа и декабре-январе для предотвращения дирофиляриоза.

При применении макрофилярицидных препаратов: меларсомина и, особенно, тиацетарсамида у собак отмечают тромбоэмболии и повышенное кровяное давление в легких. C.A.Rawlings et al. (1993) проводили специальные опыты по определению степени проявления патологии в легких после лечения собак меларсомином. До и в течение 7 недель после лечения препаратом у собак определяли клиническое состояние, гематологические и биохимические показатели, легочной гемодинамический тест; проводили радиографию грудной клетки и артериографию легких. Ни у одной собаки после лечения не отмечали кашель и диспноэ. У 6 из 9 собак при высокой степени инвазии и 4 из 8 собак при низкой степени инвазии обнаруживали дирофилярий после лечения тиацетарсамидом и у 3 из 15 - леченных меларсомином. Не отмечено разницы после лечения этими макрофилярицидами в показателях радиографии грудной клетки, артериографии легких, в клиническом состоянии животных, гемодинамическом тесте и показателях крови. Меларсомин оказался более эффективным. Он не повышал степень гипертензии и тромбоэмболии.

Меларсомин гидрохлорид одним из первых был испытан T.L.McTier et al. (1994) в штате Джорджия (США) для стратегического применения с целью профилактики клинического проявления дирофиляриоза собак. Препарат вводили 10 спонтанно инвазированным собакам в дозе 2,2 мг/кг 2 раза с интервалом 3 часа внутримышечно по стратегической схеме, т.е. 3 раза в год с интервалом 4 месяца. Собак содержали вне помещений с 5 другими собаками, не получавшими препарат. По истечении 12 месяцев животных перевели в помещение, где они находились в течение 5 месяцев. Через каждые 4-5 месяцев у собак брали пробы крови для обнаружения микрофилярий и определения уровня антител. У леченых собак микрофиляриемия значительно снизилась после первого введения меларсомина и оставалась на низком уровне. По результатам вскрытий собак получена 89,2%-ная интенсэффективность стратегической схемы применения меларсомина при дирофиляриозе. У собак контрольной группы обнаруживали от 1 до 16 экз. D.immitis (в среднем, 7,4 экз.).

Против взрослых дирофилярий в какой-то степени эффективны и ивермектины. W.C.Campbell (1989) прове

 Отправлено: 20.03.07 13:39. Заголовок: Re:

Диагностика дирофиляриоза

Прямое исследование крови
Диагностика дирофиляриоза традиционно базируется на обнаружении и идентификации микрофилярий в крови различными методами. Также необходимо принимать во внимание историю болезни и выраженность клинических признаков.

Одним из самых простых и быстрых методов обнаружения микрофилярий является метод прямого исследования мазка крови при малом увеличении микроскопа. Движущиеся микрофилярий хорошо заметны в поле зрения. Иногда их трудно увидеть из-за эритроцитов. Однако этот метод приемлем, если в крови есть микрофилярии. При "скрытой" форме дирофиляриоза и низкой интенсивности инвазии этот метод бессмыслен. Недостатком этого метода также является невозможность провести идентификацию микрофилярий по видам.

Для диагностики дирофиляриоза можно использовать метод исследования сыворотки крови. Пробу крови отстаивают, каплю сыворотки помещают на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют под малым увеличением микроскопа. Живые микрофилярий при большой концентрации переходят в сыворотку и их легко обнаруживают, так как в сыворотке нет эритроцитов. Недостатком этого метода является невозможность выявить низкую интенсивность инвазии.

Методы концентрации
Центрифугирование крови позволяет максимально сконцентрировать микрофилярии в небольшом объеме.
J.I.Knott (1939) предложил метод, сущность которого заключается в том, что в пробирку с 1 мл свежей крови добавляется 10 мл 2%-ного раствора формалина и смесь центрифугируется в течение 5 минут при 1000-1500 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость удаляют, осадок смешивают в равных количествах с 0,1%-ным раствором метиленовой сини. Из окрашенного осадка делают влажный мазок и исследуют под микроскопом.

G.Burch, H.E.Blair (1951) в пробирку с 2 мл цельной крови добавляли 1 мл 2%-ного раствора сапонина и центрифугировали 60 сек. при 4500 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость сливали, осадок исследовали под микроскопом. Этот метод более чувствителен в отношении выявления слабой интенсивности инвазии.

W.L.Newton, W.H.Wright (1956) усовершенствовали метод J.Knott (1939). 1 мл цельной крови смешивали с 10 мл 2%-ного раствора формалина и смесь центрифугировали в течение 5 минут при 1500 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость сливали, осадок смешивали в равных частях с раствором метиленового синего. 1 каплю окрашенного осадка помещали на предметное стекло, накрывали покровным и исследовали под микроскопом. Этот метод имеет ряд преимуществ перед другими: все микрофилярии концентрируются в небольшом количестве осадка, состоящего, в основном, из лейкоцитов и разрушенных гемолизированных эритроцитов. Это особенно важно при установлении заражения дирофиляриями при слабой инвазии. Данный метод достаточно надежный, при котором легко измерить длину и ширину микрофилярий.

O.W.Schalm, N.C.Jain (1966) предложили метод выявления микрофилярий гематокритным методом, при котором кровь помещают в стандартные микрогематокритные пробирки и центрифугируют в течение 5 минут при 8500 обор./мин. После центрифугирования капиллярные трубки помещают горизонтально на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Микрофилярии совершают активные волнообразные движения. При применении данного метода можно исследовать маленький объем крови и невозможно дифференцировать микрофилярий до вида. Авторы описали метод подсчета микрофилярий, используя модифицированный метод Knott. Определенный объем окрашенного осадка, полученный при использовании этого метода, помещают на предметное стекло, закрывают покровным, исследуют под микроскопом и далее подсчитывают. Однако этот метод дает приблизительное количество микрофилярий в 1 мл крови.

J.J.Mines (1967) предложил использовать для подсчета микрофилярий в крови камеру H.M.Gordon, H.V.Whitlock (1939). При использовании этого метода 0,5 мл цельной крови лизируют добавлением 7 мл 0,04%-ного раствора гидрооксида аммония. Камеру заполняют кровью и исследуют под микроскопом, микрофилярий подсчитывают. Затем количество подсчитанных микрофилярий умножают на 100 и получают число микрофилярий в 1 мл крови.

На Филиппинах ветеринарными специалистами для диагностики дирофиляриоза собак используется метод, предложенный I.Ohishi, S.Kobayashi (1961). 1 мл крови помещают в центрифужную пробирку с 9 мл Ohishi раствора, перемешивают и центрифугируют при 1500 обор./мин. в течение 5 минут. Надосадочную жидкость удаляют, осадок переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Ohishi раствор состоит из 50 мл метиленовой сини, 2 г цитрата натрия, 50 мл ацетона и 900 мл дистиллированной воды.

Модификацию метода O.W.Schalm, N.C.Jain (1966) предложил Y.D.Collins (1971). Микрогематокриты готовили в капиллярных трубках путем центрифугирования в течение 4-х минут в микрогематокритной центрифуге. Капиллярные трубки держали при температуре 17°С в вертикальном положении и исследовали в течение 21 дня. Их помещали горизонтально на чистое предметное стекло и исследовали светлый слой кровяного сгустка на наличие микрофилярий. Наблюдали за тем, как микрофилярий появлялись в целлюлярном светлом слое кровяного сгустка, чтобы проникнуть в слой плазмы в пределах секундной экспозиции в направленном пучке света. Значительная подвижность наблюдалась вплоть до 21 дня после сбора образцов крови. Удобство данного метода заключается в том, что исследование светлого кровяного сгустка может осуществляться на микрогематокрите, используемом для определения объема уплотненных клеток, пробы исследуются за короткий период, на одном предметном стекле можно исследовать сразу 5 проб. Особенно важно, что описанный метод пригоден при исследовании проб крови от животных, находящихся в карантине, когда при постановке в карантин пробы крови берут, а исследовать их можно в течение длительного периода.

Методы фильтрации
Метод фильтрации через миллипоровые фильтры предложен J.P.Wylie (1970). В шприц набирают 1 мл крови, смешивают с гепарином и добавляют 10 мл лизированного раствора. Полученный лизированный кровяной раствор из шприца пропускают через миллипоровый фильтр размером пор 8 ?. Затем через фильтр медленно пропускают 5-10 мл раствора толуидинового синего. Далее фильтр промывают 10 мл воды, отсоединяют от держателя и исследуют под микроскопом. Окрашенные микрофилярий можно дифференциировать. Этот метод не требует использования центрифуги.

В.Г.Супряга, А.И.Андреенковым (1978) для медицинской практики предложена методика диагностики филяриатозов у лиц с низкой плотностью микрофилярий в крови. Авторами разработана модификация, с помощью которой микрофилярий обнаруживают на окрашенных ультрафильтрах, через которые пропускают под вакуумом гемолизированную кровь.

Количественная диагностика
В химиотерапевтических опытах необходимо проводить количественное выявление микрофилярий.

J.R.Lindsey (1965) для подсчета микрофилярий предложил метод, при котором кровь набирают в шприц с гепарином, смешивают. Затем делают 3 мазка (2 мл), высушивают их и окрашивают раствором Гимза. Если в мазке обнаруживают, в среднем, менее 1 микрофилярии, то считают, что в 1 мл цельной крови меньше 50 микрофилярий.

Авторами монографии (Д.Р.Архипова, И.А.Архипов, 2004) предложен количественный метод прижизненной диагностики дирофиляриоза собак с использованием меланжера и счетной камеры Фукс-Розенталя. Кровь берут из ушной вены в смесительную пипетку (меланжер) до метки 1 и до метки II заполняют раствором, состоящим из ледяной уксусной кислоты, раствора Фуксина и дистиллированной воды в соотношении 3:4:93. Для равномерного смешивания меланжер с кровью и раствором кладут на вибратор на 2-3 минуты. К чистой и сухой камере Фукс-Розенталя притирают покровное стекло до появления так называемых колец Ньютона. Затем раствор в меланжере встряхивают и каплю (но не первую) наносят на среднюю часть пластинки камеры и подсчитывают количество микрофилярий под микроскопом во всех квадратах. Полученное количество микрофилярий делят на степень разбавления (10) и емкость камеры (3,2 куб.мм) и умножают на 20. Получают количество микрофилярий в 20 куб.мм крови. Метод может применяться для количественной прижизненной диагностики дирофиляриоза собак и оценки эффективности средств борьбы и профилактики заболевания, определения интенсивности инвазии в разных зонах, изучения возрастной и сезонной динамик дирофиляриоза, плодовитости самок дирофилярий, а также при подборе групп аналогов животных.

Иммунологические методы
При диагностике дирофиляриоза собак можно также использовать и иммунологические методы, при использовании которых в крови выявляются антитела против микрофилярий и взрослых дирофилярий. Это иммунофлуоресцентный (IFA) и энзим-иммуносорбентный (ELISA) методы. Этими методами можно выявить препатентную стадию заболевания и неполовозрелых дирофилярий в сердце. Позитивные результаты применения этих методов могут быть получены через 6 месяцев у собак, которых лечили против дирофиляриоза. В крови еще остаются остаточные антитела к дирофиляриям.

В опытах на 28 собаках с признаками патентного и 6 - латентного дирофиляриоза изучена эффективность энзимиммуносорбентного метода диагностики (R.G.Scholtens, S.Patton, 1983). Сыворотку крови собаки сследовали энзимиммуносорбентным методом с использованием антигена, приготовленного из D.immitis. Средний геометрический титр антител оказался равным 30 у незараженных собак и 2896 у собак с признаками латентного дирофиляриоза без проявления микрофиляриемии, но с наличием изменений в легких, выявленных методом радиографии. Титр антител 28 собак при патентном дирофиляриозе составил 122. Авторами установлено, что титр антител у собак при латентном дирофиляриозе оказался значительно выше титра антител незараженных собак и собак с признаками патентной инвазии.

I.BJ.Buoro, R.B.Atwell (1983) сообщают о 100%-ной эффективности иммуноферментного метода для диагностики латентного дирофиляриоза собак. Тест показал положительные результаты в 88% случаев у собак с наличием микрофилярий в крови.

Новый диагностический тест с использованием моноклональных антител предложили использовать в диагностике дирофиляриоза D.B.Rylatt et al. (1984). Этот тест является наиболее чувствительным и специфичным, позволяет установить диагноз при латентном дирофиляриозе и предотвращает возможность перекрестной реакции у собак, зараженных Dipetalonema reconditum.

При использовании иммунологических методов диагностики возможна перекрестная реакция к антигенам других паразитов, таких как D.reconditum, токсокары и трихоцефалы (R.J.Wilkins, D.Ciurea, 1985).

T.E.Martin, G.H.Collins (1985) сравнивали эффективность различных методов ELISA в диагностике дирофиляриоза собак. "Dirotect" выявлял 80% из 30 случаев латентного дирофиляриоза и 95% - из 20 собак с наличием микрофилярий в крови, однако давал положительные реакции в 47% случаев у собак, свободных от данной инвазии.

R.B.Grieve et al. (1986) испытали эффективность энзимиммуносорбентного метода и метода непрямой иммунофлуоресценции при диагностике дирофиляриоза. Количество собак, положительно реагирующих при использовании ELISA, увеличивалось с возрастом собак и коррелировало со степенью инвазированности взрослыми D.immitis, обнаруженными при вскрытии. Эффективность метода непрямой иммунофлуоресценции была значительно ниже. В группе собак в возрасте 12 мес. эффект метода ELISA составил 65%.

Clq-ELISA показал высокий диагностический эффект в опытах K.Matsumura et al. (1986). Специфичность Clq-ELISA была изучена при различном уровне иммуноглобулинов в крови. Концентрация иммуноглобулина G в мл сыворотки крови зараженных собак с микрофиляриемией и без наличия микрофиляриемии составила соответственно 130,5 и 219,7 мкг/мл. У незараженных щенков и взрослых собак уровень иммуноглобулина G оказался равным соответственно 6,0 и 37,5 мкг/мл.

Энзимиммуносорбентный метод "Filarochek" (J.F.Levine et al., 1988) оказался наиболее эффективным при диагностике дирофиляриоза по сравнению с исследованием крови методом Knott и посмертным вскрытием.
L.C.Wang (1997) считает метод ELISA намного чувствительнее метода Knott. При использовании метода ELISA автор установил 55%-ную зараженность собак D.immitis на Тайване.

C.G.N.Fernandes et al. (2000) изучили распространение дирофиляриоза среди собак города Гуибы (Бразилия) исследованием крови усовершенствованным методом Knott и серологическим методом иммуноблотинга. Всего исследовано 822 пробы крови. При применении иммуноблотинга антитела против D.immitis выявлены у 11,81, а усовершенствованным методом Knott микрофилярий обнаружены в 0,41% исследованных проб. Методом иммуноблотинга получен 11,27% -ный положительный результат в пробах крови, в которых ранее микрофилярий усовершенствованным методом Knott не находили.

W.Tarello (2001) испытал эффективность метода концентрации (Difil-test) и серологического теста на собаках из эндемичных и неэндемичных по дирофиляриозу районов Италии. Метод концентрации показал высокую эффективность при диагностике дирофиляриоза собак из разных районов. Однако при использовании серологического теста получены отрицательные результаты на собаках из неэндемичных районов. Таким образом использование серологических антигенов при диагностике дирофиляриоза не эффективно при слабой степени инвазии, когда в организме собаки паразитируют дирофилярии одного пола.

Радиография
Радиографию можно использовать при диагностике скрытой формы дирофиляриоза (J.M.Losonsky, D.E.Thrall, R.E.Lewis, 1983). Для дирофиляриоза наиболее характерны изменения в правом желудочке и артериях правой краниальной доли легкого, выражающиеся в увеличении желудочка и диаметра артерий.

В опытах J.D.Hoskins et al. (1984) наибольшие изменения при дирофиляриозе, вызванном D.immitis, также проявлялись в виде расширения правого желудочка сердца и увеличения размеров легочных артерий паренхимы легких.

L.T.Glickrnan et al. (1984) считают, что лучшего результата при диагностике дирофиляриоза собак можно достичь при одновременном: исследовании крови методом Knott, радиографии грудной клетки, использовании серологических тестов и учета клинических признаков заболевания.

Методы дифференциальной диагностики
При диагностике дирофиляриоза необходимо дифференцировать микрофилярии до вида. Микрофилярии D.immitis и D.repens можно дифференцировать, учитывая их внутреннее строение.

Для дифференциации микрофилярий S.Pampiglione, T.G.Canestri, F.Rivasi (1995) пробы крови фиксировали в 2%-ном растворе формалина. Микрофилярий D.immitis имели длину 262-338, ширину 4-6,2 микрон, их дифференцируют от Dipetalonema reconditum, которые короче и тоньше (241-287 х 3,8-5 микрон; C.F.Schrey, 1996) и часто изгибаются.

Микрофилярий D.repens крупнее D.immitis 270-379 микрон длиной и шириной 6-8,3 микрон. Головной конец микрофилярий D.repens имеет округлую форму и прозрачный цвет, у микрофилярий D.immitis - коническую форму и темный цвет (S.Pampiglione, T.G.Canestri, F.Rivasi, 1995).

G.Favia et al. (1996) предлагают дифференцировать D.immitis и D.repens, используя полимеразную цепную реакцию.

Микрофилярий D.immitis и D.repens можно дифференцировать по форме головного и хвостового концов (G.Traldi, 1987). Головной конец микрофилярий D.repens имеет округлую форму, он короткий и прозрачный, а у микрофилярий D.immitis - конической формы и темного цвета.

Другие методы диагностики
В некоторых случаях при диагностике дирофиляриоза, вызванного D.immitis, можно использовать рентгенографию грудной клетки, эхокардиографию и электрокардиографию, которые позволяют оценить интенсивность инвазии по изменениям внутренних органов. При применении этих методов можно оценить изменения в легочных артериях (расширение, демаркацию, повышенное давление), легких (инфильтрацию), сердце (тахикардию, кардиомегалию правого желудочка и его гипертрофию, недостаточность трехстворчатого клапана, расширение правого желудочка и предсердия).

Сравнительная эффективность диагностических методов
S.Kume (1970) считает, что при исследовании прямого мазка выявляется только 25% зараженных дирофиляриями собак. Методы концентрации значительно эффективнее. Автор сравнил эффективность метода концентрации и исследования мазка в разные сезоны года. И зимой, и летом эффективность метода концентрации микрофилярий составила 100%, тогда как методом мазка соответственно 75,5 и 93,5%.

При сравнении эффективности четырех диагностических тестов, прямого влажного мазка, модифицированного метода Knott, метода концентрации и капиллярной седиментации, J.P.Wylie (1970) установлена наибольшая точность модифицированного метода Knott и метода фильтрации. При использовании метода концентрации на исследование одной пробы крови затрачивалось около 6, при методе фильтрации - меньше 1 мин. Преимуществом метода фильтрации J.P.Wylie считает возможность исследовать до 2-3 мл крови, в то время как при применении модифицированного метода Knott исследуют 1 мл.

Наиболее точным методом выявления микрофилярий в периферической крови N.H.Altman (1972) считает метод использования миллипорового фильтра. Автором не выявлено разницы в количестве выявляемых микрофилярий при взятии крови из ушной, головной вены и латеральной вены голени.

A.D.J.Watson, F.L.Testoni, W.L.Porges (1973) провели опыт по сравнению длины микрофилярий, выявленных модифицированным методом Knott и методом фильтрации. Ими установлено, что при использовании метода фильтрации микрофилярий D.immitis становятся значительно короче (256,7 в сравнении с 301,3 микрон при исследовании модифицированным методом Knott).

По данным R.S.Desowitz, B.A.Southgate (1973) при исследовании методом мембранной фильтрации 1 мл крови, взятой из вены, процент выявляемое микрофилярий возрастает в 1,5-3 раза по сравнению с результатами обследования методом толстой капли.

J.D.Kelly (1973) проанализировал эффективность разных методов диагностики дирофиляриоза собак и пришел к выводу, что наиболее успешными являются усовершенствованный метод Knott и метод фильтрации.

E.T.Carlos, L.L.Magaway, F.T.Calalay (1979) сравнили эффективность модифицированного метода Knott и метода I.Ohishi, S.Kobayashi (1961) при исследовании 600 проб крови собак. 348 и 370 проб крови, исследованных соответственно модифицированным методом Knott и методом Ohishi, показали положительные результаты. Преимуществами метода Ohishi является вязкая структура седимента, не позволяющая ему растекаться по предметному стеклу, и более темная окраска микрофилярий.

Для диагностики дирофиляриоза А.А.Гаврилов (1976) использовал метод Knott в модификации J.R.Lindsey (1965) с целью подсчета числа микрофилярий в периферической крови. 1 мл крови смешивали с 10 мл 2%-ного раствора формалина. Смесь центрифугировали в течение 5-8 мин. при 1500 об./мин. Надосадочную жидкость сливали, а осадок смешивали с равным объемом метиленовой сини в разведении 1:1000. Микрофилярий размером 0,22-0,31 х 0,006-0,008 мм обнаруживали в мазках крови (3-27 в поле зрения) и паренхиматозных органах: в легких - 2-16, печени - 1-9, селезенке - 1-6 экз. в поле зрения (Об. 3,7 или 9 х 12,5).

D.J.Lahitte, B.Davoust, P.Dorchies (1986) провели сравнительное изучение 5 методов обнаружения микрофилярий в крови собак: с помощью фиксированного мазка, толстой капли, раздавленной капли, центрифугированием крови и ее фильтрацией. В 33, 49, 49, 75 и 75 случаях соответственно находили микрофилярий D.immitis. Авторы рекомендуют при диагностике дирофиляриоза использовать методы центрифугирования и фильтрации.

C.A.Calvert (1987) сравнил эффективность диагностических тестов выявления микрофилярий в крови инвазированных собак: метода прямого исследования мазка, концентрации, гематокритной седиментации, Knott и методом ELISA. Метод концентрации микрофилярий оказался на 10-15% чувствительнее, чем метод прямого мазка. Чувствительность метода ELISA составила 85-90%.

M.Maitini et al. (1991) сравнили эффективность различных методов диагностики дирофиляриоза: мазка крови, модифицированного метода Knott и новой модификации метода Knott при исследовании проб крови от 329 собак на севере Италии. В качестве контроля использовали метод фильтрации, с помощью которого в 160 пробах обнаружены микрофилярий D.immitis, в 2-х - D.repens и 1-й - микрофилярий обоих видов. Установлена 88,3; 91,0 и 91,8%-ная чувствительность соответственно метода мазка, модифицированного метода Knott и новой модификации метода Knott. Модифицированные методы Knott обладают 100%-ной эффективностью.

При исследовании 94 проб крови от бездомных собак в Мехико B.C.Garfias et al. (2001) сравнили 3 метода диагностики дирофиляриоза: метод исследования в толстом слое, мазка крови и прямого исследования и установили соответственно 100; 82,6 и 30,4%-ную их эффективность.

При прямом исследовании крови микрофилярий выявлялись в 80,9% из 204 проб с микрофиляриями в крови, выявленными модифицированным методом Knott. Установлена 100%-ная эффективность выявления микрофилярий прямым исследованием крови при интенсивности инвазии выше 50 микрофилярий в 1 мл и 44,3%-ная - при наличии в 1 мл крови менее 50 микрофилярий (C.H.Courtney, Q.Y.Zeng, 2001).

С.В.Величко и др. (2001) считают наиболее результативными методами диагностики дирофиляриоза модифицированный метод Knott и метод обогащенного мазка.

Влияние различных факторов на диагностику дирофиляриоза

Суточная периодичность микрофиляриемии
Данные по суточной периодичности микрофилярий в крови собак весьма противоречивы. Механизм периодичности микрофилярий пытались объяснить многие ученые. Существует 2 доминирующие гипотезы по поводу объяснения этого феномена: 1 цикличность воспроизводительной способности самок филярий; 2 - миграция личинок из кровеносной системы хозяина в органы и ткани (D.Katamine, 1972). Периодичность микрофиляриемии может быть выражена по-разному в разных природно-климатических условиях.

Так, по утверждениям Э.И.Шлейхера (1948) в условиях Узбекистана в течение суток периодичности микрофиляриемии у собак нет!

J.Euzeby, B.Laine (1951) во Франции наименьшее количество микрофилярий в крови обнаружили в 8 часов утра, наибольшее - в 8 часов вечера.

В опытах W.A.F.Webber, F.Hawking (1955) установлена суточная периодичность микрофилярий D.repens и D.immitis. Наименьшее количество микрофилярий составляло 20-40% от наибольшего у D.repens и 5-20% у D.immitis. Максимальное и минимальное количество микрофилярий D.repens приходилось соответственно на середину ночи и середину дня, а у D.immitis - на 6 часов вечера и 6 часов утра. По данным авторов цикл развития D.repens адаптировался к виду комаров, которые активно нападают в течение ночи, а D.immitis - после полудня и вечером.

S.Kume (1960) сравнивал концентрацию микрофилярий D.immitis в легочных сосудах собак в дневное и ночное время. Количество микрофилярий в легочных сосудах было в 593 раза больше, чем в периферической крови в дневное время и в 28 раз - ночью.

M.S.Tongson, F.R.Romero (1962), S.Kume, I.Oishi (1970) установили цикличность микрофиляриемии. Наибольшее количество микрофилярий D.immitis в крови собак авторы установили в период с 19.45 вечера до 12.40 ночи, минимальное - с 6.50 утра до 16.55 дня.

В Америке наибольшее число микрофилярий отмечено в крови собак ночью (F.A.Tarplee, R.E.Bradley, 1982).
Несколько отличаются данные R.B.Grieve, S.Lauria (1983). Авторами установлена наибольшая плотность микрофилярий в крови в период максимальной активности собак, т.е. в 12-16 часов.

D.Abraham, R.B.Grieve, J.A.Oaks (1990) также утверждают о наличии периодичности в численности циркулирующих в крови микрофилярий в течение дня. Максимальное количество микрофилярий в крови авторы обнаруживали после обеда.

Периодичность микрофилярий D.immitis в крови зараженных собак изучал в условиях Танзании Y.G.Matola (1991). Однако его данные диаметрально противоположны результатам предыдущих исследователей: максимальное количество микрофилярий в крови находили в 11 часов утра, минимальное - в 10 часов вечера.

В условиях Кореи цикличность микрофиляриемии у собак, зараженных D.immitis, изучали J.K.Rhee, S.S.Yang, H.C.Kim (1998). Наибольшее количество микрофилярий в крови зараженных собак находили в 9 часов вечера, минимальное - в 11 часов утра.

В Иране пик микрофилярий D.immitis в крови спонтанно инвазированных собак B.Meshgi, A.Eslami, J.Ashrafi (2001) отмечали в 1 час ночи, минимальное количество - в 11 часов.

В результате исследований (Д.Р.Архипова, И.А.Архипов, 2004) получена существенная разница в количестве обнаруженных микрофилярий D.immitis и D.repens в разное время суток. Максимальное количество микрофилярий в крови собак, инвазированных D.immitis, обнаруживали в вечернее время, а именно в период с 19 до 21 часа. Утром количество микрофилярий D.immitis в крови собак значительно снижалось и составило около 10% от их количества в вечернее время. Среднее количество микрофилярий D.immitis в 20 куб.мм периферической крови собак составило утром 19,2+2,0, днем 38,4+4,5, вечером 227,0±14,2 и ночью 108,6±11,4 экз.

Разница между максимальным и минимальным количеством микрофилярий в крови собак была более выражена при дирофиляриозе, вызванном D.immitis. Так, утром количество микрофилярий D.immitis в 20 куб.мм крови собак составило 8,5% от этого показателя в вечернее время, а при дирофиляриозе, вызванном D.repens, количество микрофилярий в крови собак ночью было на 71,0% больше по сравнению с показателем в дневное время.

Таким образом, по данным литературы и собственным исследованиям можно утверждать, что периодичность микрофиляриемии в течение суток существует и для установления диагноза при дирофиляриозе пробы крови для исследования целесообразнее брать в вечерне-ночное время.


Сезонная периодичность микрофиляриемии
Имеются данные о существовании сезонной периодичности микрофиляриемии у зараженных дирофиляриями собак.

Так, Э.И.Шлейхером (1948) сезонная периодичность в появлении микрофилярий D.repens в периферической крови установлена у собак в Узбекистане. Резкое уменьшение количества микрофилярий наступало дважды в те месяцы, когда обычно отмечали значительное понижение температуры - первый раз в декабре и второй раз - в ноябре.

По данным J.W.Ward, M.A.Franklin (1953) наибольшее число микрофилярий D.immitis выявляли в крови собак в марте-апреле.

D.E.Eyles et al. (1954) провели исследование крови и вскрытие 204 собак Мемфиса (США) и установили, что наименьшее количество микрофилярий в крови и взрослых D.immitis в сердце и легочных артериях обнаружено в зимние месяцы, чем в осенние.

A.D.J.Watson, W.L.Porges, F.J.Testoni (1973) отмечали сезонность дирофиляриоза в Австралии. Наибольшее количество микрофилярий в крови собак авторы установили в августе-ноябре, наименьшее - в феврале-мае.
Сезонную периодичность с пиком микрофилярий в крови в летние месяцы Y.Aoki (1971) связывает с повышением температуры окружающей среды, T.Masuya (1976) объясняет увеличением светового дня, а Е.М.Church, J.R.Georgi, D.S.Robson (1976) выдвинули гипотезу о влиянии эмоционального состояния собак на цикличность микрофилярий в крови.

Количество микрофилярий в 1 мл крови у собак, исследованных А.А.Гавриловым (1976), колебалось в зависимости от сезона года ( в среднем): 1 квартал - 3200,0; П кв. - 5678,5; Ш кв. - 22657,1 и 1У кв. - 10547,8 экз.

Т.П.Худавердиев (1976), Т.П.Худавердиев и Ш.М.Джафаров (1979) отмечали сезонность в распространении дирофиляриоза собак в Нахичеванской АССР. Авторы установили максимальную зараженность собак дирофиляриями D.repens в июне и июле в низменной зоне республики, где расположены обширные постоянные заболоченные участки.

F.Mizuno, T.Higashio, T.Matsumura (1981) выявили сезонную периодичность микрофилярий в крови собак в окрестностях г.Токио. Весной, летом, осенью и зимой микрофилярий D.immitis обнаруживали соответственно у 28,8; 37,1; 19,5 и 9,2% собак.

В условиях теплого климата побережья залива в США (шт. Флорида, Бартон, Луизиана и др.) передача дирофиляриозной инвазии через комаров зависит от сезона года. При вскрытии 109597 экз. комарор нескольких родов и видов микрофилярий D.immitis не находили в декабре, январе, феврале и марте (K.J.Watts et al., 2001).

За 1998-2000 гг. Н.С.Василик (2001) проанализировала 66 случаев дирофиляриоза собак в регионе г.Киева и близлежащих областей и установила максимальную зараженность собак в июле-августе.

Результаты изучения сезонной периодичности микрофилярий в крови собак при дирофиляриозе в условиях Калмыкии свидетельствуют о существенной разнице в количестве микрофилярий как D.immitis, так и D.repens в крови животных в разные сезоны года (Д.Р.Архипова, 2003). Максимальное количество микрофилярий D.immitis и D.repens в крови собак обнаруживали летом. Осенью микрофиляриемия снижалась у собак, зараженных D.immitis, на 69,8, а инвазированных D.repens - на 67,2%.

Зимой микрофилярий D.immitis и D.repens в крови собак находили в незначительном количестве и не у всех зараженных собак. Количество микрофилярий зимой снижалось на 99,7% по сравнению с их уровнем в летний период. Весной (апрель) микрофиляриемия у собак снова повышалась, достигая более 55,0% от летнего уровня. Среднее количество микрофилярий D.immitis в 20 куб.мм крови собак составило весной (апрель) 82,6±8,3, летом (июль) 227,0±9,5, осенью (октябрь) 68,6±5,5 и зимой (январь) 11,2±2,7 экз. Среднее количество микрофилярий D.repens в этом объеме крови собак было равным в апреле, июле, октябре и январе соответственно 70,0±6,7, 153,8±9,6, 50,4±4,1 и 14,0±3,2экз.

Таким образом, микрофиляриемия повышается в летние месяцы и снижается в зимние, т.е. наибольшее количество микрофилярий в крови отмечается в теплые месяцы, когда максимальна численность комаров, являющихся промежуточными хозяевами дирофилярий, что позволяет в природе осуществить передачу и дальнейшее распространение инвазии. В связи с этим при дирофиляриозе пробы крови для плановых исследований целесообразно брать в летний период.


Провокация микрофиляриемии
Наличие суточной и сезонной диапауз создает трудности для обнаружения микрофилярий в крови. С этой целью можно использовать средства, провоцирующие микрофиляриемию.
I.Oishi, S.Kume (1957) установили провоцирующее действие на микрофилярий диэтилкарбамазина в дозе 2,0 мг/кг при исследовании крови днем. Через 15 мин. после введения диэтилкарбамазина в крови отмечали максимальное количество микрофилярий. По данным D.Katamine (1959) и H.Fukamachi (1960) пилокарпин и ацетилхолин обладают провоцирующим действием на микрофилярий. При введении этих препаратов наблюдается внезапный подъем количества микрофилярий в крови собак, которое через час опять снижается. Аналогичные результаты получены I.Sanger, G.Lammler (1978) в отношении диэтилкарбамазина.

Авторами монографии, в качестве средства, провоцирующего микрофиляриемию, испытан дексаметазон на 5 собаках, экспериментально инвазированных D.repens (Д.Р.Архипова, 2003). Дексаметазон в форме инъекционного раствора вводили собакам внутримышечно в дозе 4 мг на животное. До и через 0,5; 1; 2 и 3 часа после введения дексазона у собак брали пробы крови для исследования и учета количества микрофилярий в 20 куб.мм крови. Отмечено существенное повышение концентрации микрофилярий в крови собак после его введения, особенно, в первые 30-60 минут. В последующие сроки исследований количество микрофилярий в крови значительно снижалось. У животных контрольной группы, не получавших препарат, концентрация микрофилярий в течение опыта существенно не изменялась.

Количество микрофилярий в 20 куб.мм крови собак, инвазированных D.repens, составило до введения дексаметазона 153,2±7,6 экз. и через 0,5; 1; 2 и 3 часа 268,8±21,4; 262,4±17,0; 203,0±15,6 и 164,8±14,2 экз. соответственно.

Таким образом, использование дексаметазона в дозе 4 мг на голову вызывает провокацию микрофиляриемии у собак в первые 60 минут после его введения, что позволяет в большем количестве выявлять микрофилярий в крови и более эффективно установить диагноз, особенно, при слабой интенсивности инвазии или в период сезонной диапаузы (зимой) или суточной периодичности (днем).

Терапия дирофиляриоза

Макрофилярициды
В настоящее время существует 2 препарата, одобренные FDA (Всемирная организация по кормам при ООН) для лечения дирофиляриоза. Оба препарата - соединения мышьяка: тиацетарсамид натрия (капарсолат, "Мериал") и меларсомин дигидрохлорид (иммитицид, "Мериал").

Тиацетарсамид натрия успешно применяли при дирофиляриозе с умеренно выраженными признаками в дозе 0,22 мл/кг внутривенно 2 раза в день в течение 2 дней. При нарушениях дыхания и сердечной деятельности эффект препарата снижался (С. H.Carlisle, 1970).

В опытах M.T.Sudermann, T.M.Craig (1984) тиацетарсамид натрия проявил 100%-ный эффект против взрослых дирофилярий в дозе 2,2 мг/кг внутривенно 2 раза в день в течение 2 дней.

По безопасности и эффективности применения меларсомин дигидрохлорид (иммитицид) превосходит тиацетарсамид (J.P.Raynaud, 1990; D.H. Knight, 1992). Меларсомин в дозе 2,5 мг/кг дважды в день сохранялся в организме в 5 раз дольше, чем тиацетарсамид (A.Vezzoni, C.Genchi, J.-P.Raynaud, 1992). По данным этих авторов, при испытании меларсомина на 382 собаках, токсическое действие на печень не отмечено ни у одной, тогда как при применении тиацетарсамида у 15-30% собак наблюдали гепаторенальную токсичность. Однократное и двукратное применение меларсомина в дозе 2,5 мг/кг действует губительно соответственно на 50 и 96% дирофилярий. Наиболее частые побочные явления при применении меларсомина заключались в проявлении воспалительной реакции на месте введения.

О результатах сравнительного испытания тиацетарсамида и меларсомина при дирофиляриозе собак сообщал J.P.Raynaud (1992). Оба препарата автор испытал при разной степени зараженности собак. В предварительном опыте на экспериментально зараженных собаках испытан меларсомин в дозе 2,5 мг/кг два раза с интервалом 24 часа при внутримышечном введении. Для дальнейших испытаний автор предложил применять препарат в дозе 2,2 мг/кг 2 раза с интервалом 3 часа с учетом данных фармакокинетики меларсомина. Рекомендуется применять меларсомин по специально адаптированной программе с учетом клинического состояния заболевших собак и индекса безопасности препарата, равного 2,5-3.

Тиацетарсамид является гепатотоксичным и даже нефротоксичным препаратом в терапевтической дозе. Эти препараты отличаются по эффективности. Меларсомин эффективен как против взрослых, так и личинок 5-й стадии, т.е. он активен против 7 и 4-месячных дирофилярий. Тиацетарсамид оказывает губительное действие только на взрослые дирофилярий, начиная с 7 месяцев. Клинические испытания показали, что меларсомин является эффективным, относительно безопасным и удобным в применении препаратом (внутримышечно). Тактическое применение меларсомина целесообразно проводить в дозе 2,2 мг/кг дважды с интервалом 3 часа 2 раза в год в середине августа и декабре-январе для предотвращения дирофиляриоза.

При применении макрофилярицидных препаратов: меларсомина и, особенно, тиацетарсамида у собак отмечают тромбоэмболии и повышенное кровяное давление в легких. C.A.Rawlings et al. (1993) проводили специальные опыты по определению степени проявления патологии в легких после лечения собак меларсомином. До и в течение 7 недель после лечения препаратом у собак определяли клиническое состояние, гематологические и биохимические показатели, легочной гемодинамический тест; проводили радиографию грудной клетки и артериографию легких. Ни у одной собаки после лечения не отмечали кашель и диспноэ. У 6 из 9 собак при высокой степени инвазии и 4 из 8 собак при низкой степени инвазии обнаруживали дирофилярий после лечения тиацетарсамидом и у 3 из 15 - леченных меларсомином. Не отмечено разницы после лечения этими макрофилярицидами в показателях радиографии грудной клетки, артериографии легких, в клиническом состоянии животных, гемодинамическом тесте и показателях крови. Меларсомин оказался более эффективным. Он не повышал степень гипертензии и тромбоэмболии.

Меларсомин гидрохлорид одним из первых был испытан T.L.McTier et al. (1994) в штате Джорджия (США) для стратегического применения с целью профилактики клинического проявления дирофиляриоза собак. Препарат вводили 10 спонтанно инвазированным собакам в дозе 2,2 мг/кг 2 раза с интервалом 3 часа внутримышечно по стратегической схеме, т.е. 3 раза в год с интервалом 4 месяца. Собак содержали вне помещений с 5 другими собаками, не получавшими препарат. По истечении 12 месяцев животных перевели в помещение, где они находились в течение 5 месяцев. Через каждые 4-5 месяцев у собак брали пробы крови для обнаружения микрофилярий и определения уровня антител. У леченых собак микрофиляриемия значительно снизилась после первого введения меларсомина и оставалась на низком уровне. По результатам вскрытий собак получена 89,2%-ная интенсэффективность стратегической схемы применения меларсомина при дирофиляриозе. У собак контрольной группы обнаруживали от 1 до 16 экз. D.immitis (в среднем, 7,4 экз.).

Против взрослых дирофилярий в какой-то степени эффективны и ивермектины. W.C.Campbell (1989) прове

 Отправлено: 20.03.07 13:40. Заголовок: Re:

Профилактика дирофиляриоза

Профилактику гельминтозов, в том числе дирофиляриоза собак, проводят с учетом биологии гельминтов и эпизоотологических особенностей гельминтозов с использованием препаратов, действующих на взрослые и личиночные стадии гельминтов, с целью разрыва цикла развития паразита.

Диэтилкарбамазин. J.N.Aubrey (1969) против развивающихся стадий дирофилярий испытал диэтилкарбамазин в дозе 200 мг на 10 кг массы тела собак 3 дня подряд каждые 2 месяца и получил положительный результат. Через 6 месяцев в крови леченых собак микрофилярий D.immitis не обнаружили.

R.J.Warne, V.J.Tipton, Y.F.Furusho (1969) также испытали эффективность диэтилкарбамазина цитрата против развивающихся стадий D.immitis. Препарат задавали собакам в форме таблеток в дозе 5,5 мг/кг ежедневно 6 дней в неделю в течение 6 месяцев, начиная с 15 мая и по 16 ноября. При вскрытии собак через 120 дней после последнего экспериментального заражения, у 3 из 4-х собак взрослых дирофилярий не обнаружили.

В условиях Японии (Токио) заражение дирофиляриями возможно с июня по октябрь. В период с октября по февраль инвазионные личинки мигрируют в сердце и, примерно, с середины января превращаются во взрослых дирофилярий и начинают продуцировать микрофилярий. Учитывая это, S.Kume (1970) предлагает проводить профилактическую обработку собак против развивающихся стадий D.immitis с июня по март, используя диэтилкарбамазин цитрат в дозе 2,5 мг/кг ежедневно в течение 60 дней.

J.L.Fowler et al. (1970) предложили использовать диэтилкарбамазин и фентион в целях профилактики дирофиляриоза. В дозе 3,3 мг/кг при оральном применении 6 раз в неделю в течение 6 месяцев диэтилкарбамазин значительно снижал количество взрослых дирофилярий у собак, экспериментально зараженных дирофиляриями в дозе 100 инвазионных личинок на голову. Фентион в дозах 2,2 и 4,4 мг/кг при таком же курсе показал подобный результат.

G.S.Tulloch et al. (1972) проводили экспериментальное заражение свободных от дирофилярий собак путем инъекции соответственно по 13, 30, 16 и 76 инвазионных личинок D.immitis на голову на 1, 17, 23 и 49-й дни опыта. В дозе 6,6 мг/кг ежедневно, начиная с первого дня после первого заражения, диэтилкарбамазин цитрат показал 100%-ный профилактический эффект против развивающихся стадий дирофилярий при многократном заражении, которое чаще всего наблюдается в естественных условиях.

Однако, многочисленными исследованиями установлено, что диэтилкарбамазин может вызывать шок у собак, зараженных дирофиляриями, вследствие возникновения аллергической реакции из-за гибели микрофилярий (N.L.Garlic 1976; N.E.Palumbo, R.S.Desowitz, S.F.Perri, 1981;R.B.Atwell,P.F.L.Boreham, 1983).

Мебендазол. J.W.McCall, H.H.Crouthamel (1976) на собаках, экспериментально зараженных D.immitis путем подкожного введения инвазионных личинок, испытали мебендазол в дозе 40 или 80 мг/кг в день в течение 30 дней и получили 100%-ный эффект против развивающихся стадий дирофилярий.

Флубендазол [метил 5-(4-флуоробензоил-2-ил] карбамат. Против развивающихся стадий D.immitis эффективным оказалось пятикратное введение собакам флубендазола в дозе 50 мг/кг через 2 месяца после их экспериментального заражения. Дирофилярий в сердце и легочных артериях при вскрытии собак через 6 месяцев после заражения не находили (J.Guerrero et al., 1983).

Авермектины. Эффективность ивермектина против личинок D.immitis у собак впервые установили W.C.Campbell, L.S.Blair (1978). Ивермектин предотвращает развитие неполовозрелых дирофилярий, тем самым профилактируя дирофиляриоз.

L.S.Blair, W.C.Campbell (1980) и McCall et al. (1981) сообщали о том, что ивермектин в дозах 0,05; 0,1 и 0,2 мг/кг, введенный через 3 месяца после экспериментального заражения, проявляет не полную эффективность против личинок пятой стадии.

При применении ивермектина в дозе 0,05 мг/кг однократно сразу, через 1 и 2 месяца после заражения отмечали 100%-ную эффективность против личинок дирофилярий третьей и четвертой стадии (L.S.Blair, W.C.Campbell, 1980; L.S.Blair et al., 1982), а в дозе 0,003 и 0,0125 мг/кг эффективен против личинок четвертой стадии при введении через 1 месяц после заражения (McCall et al., 1981).

A.J.Paul et al. (1986) испытали ивомек с целью профилактики дирофиляриоза. В дозах 0,3; 1,0; 2,0; 3,3 мг/кг препарат, заданный собакам на 30-й день после экспериментального заражения, показал соответственно 0; 53,2; 97,2 и 98,1%-ную эффективность против развивающихся стадий D.immitis. При введении препарата в дозе 2,0 мг/кг через 45 дней после заражения эффект препарата снижался. Эффективность ивомека оценивали через 154 дня после заражения путем гельминтологического вскрытия сердца и легких.

I.Ohishi et al. (1987) испытали ивермектин в дозах 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 мкг/кг при введении орально однократно собакам через 30 дней после экспериментального заражения путем подкожной инокуляции инвазионных личинок D.immitis в дозе по 106-111 экз. на голову и получили 100%-ную эффективность в дозах 3,0 и 5,0 мкг/кг. При вскрытии подопытных собак через 150 дней после заражения дирофилярий в сердце и легочных артериях не находили, тогда как у контрольных нелеченых собак обнаруживали, в среднем, 57,8 взрослых D.immitis.

Чтобы предотвратить развитие дирофилярий в организме собак инвазионные личинки должны быть убиты до того, как они мигрируют в сердце (I.Ohishi et al.,1987). Ивермектин в дозе 6 мкг/кг недостаточно эффективен против инвазионных личинок D.immitis при введении сразу после экспериментального заражения и эффективен против ранних и поздних личинок 4 и 5-й стадий (до 2-х мес.). Авторами установлена различная чувствительность личинок дирофилярий к действию ивермектина. Чувствительность инвазионных личинок (L3) сразу после экспериментального заражения, личинок поздней l4 и ранней L5 стадии (60 дней после заражения) и личинок 4-й стадии (30 дней после заражения) к действию ивермектина можно оценить как соответственно слабую, высокую и наивысшую. Проведенные исследования показали, что ивермектин более эффективен против развивающихся самок дирофилярий, чем самцов.

При применении ивермектина в дозе 6 мкг/кг 4 раза с месячным интервалом собакам за 17 и 7 дней до и на 5-й день после экспериментального заражения дирофиляриями, I.Ohishi et al. (1988) установили 100%-ную эффективность против развивающихся стадий D.immitis.

Личинки дирофилярий 4-й стадии необычайно чувствительны к действию ивермектина. Даже однократные дозы менее 1 мкг/кг эффективны против них, однако такие дозы не дают стабильного эффекта. На практике дозой 6 мкг/кг достигается максимальный эффект в любых случаях (W.C.Campbell, 1989). Значительное снижение эффективности наблюдается при применении ивермектина через 3 месяца после заражения, что, вероятно, связано с увеличением количества личинок, превратившихся в личинок 5-й стадии, устойчивых к действию препарата.

Ивермектин в форме таблеток и 2 новые формы ивермектина в дозе 6 мкг/кг, которые задавали щенкам в возрасте меньше года через 30 и 45 дней после их экспериментального заражения D.immitis, по данным A.J.Paul et al. (1991) проявили 100%-ный профилактический эффект.

S.Z.Coskin et al. (1992) испытали ивермектин в дозе 200 мкг/кг против развивающихся стадий D.immitis и получили 99; 98; 95 и 94%-ный эффект соответственно на 7-90; 120; 150 и 180-210-й дни после экспериментального заражения собак.

Ивермектин в дозе 6 мкг/кг задавали незараженным D.repens собакам один раз в месяц 7 раз, начиная с мая. Опыт проводили в эндемичной по дирофиляриозу местности в Италии (A.Marconcini, M.Magi, B.Hecht Contin, 1993). Через 6-8 мес. после последней дачи препарата все собаки были также свободны от дирофилярий. Микрофилярии в крови собак контрольной группы, неполучавших ивермектин, начинали обнаруживать на 7-8-й месяцы после начала эксперимента. При вскрытии у всех контрольных собак обнаруживали взрослых или неполовозрелых дирофилярий. Таким образом, применение ивермектина собакам в неблагополучной по дирофиляриозу зоне Италии на 100% профилактировало их заражение. 155 собакам, свободным от дирофилярий по результатам исследования крови и негативной серологической реакции, задавали ивермектин/пирантел 6 раз с месячным интервалом, начиная с мая. Собакам задавали ивермектин/пирантел в минимальной дозе по 68 мкг ивермектина и 58 мг пирантела. Через 6 и 12 месяцев после первого применения микрофилярий D.repens или D.immitis в крови леченых собак не находили. У контрольных собак, необработанных, в крови находили микрофилярии D.repens (M.Pollmeier, F.Pollono, L.Rossi, 1996).

Мильбемицин оксим выделен путем ферментации грибка Streptomyces hygroscopicus aureolacrimosus и впервые успешно испытан против развивающихся личинок D.immitis

R.B.Grieve et al. (1989). Профилактическая эффективность мильбемицина Д против неполовозрелых D.immitis установлена T.Sakamoto et al. (1984). Мильбемицин Д, заданный собакам в дозе 5 мг/кг per os 20 раз с 15-дневным интервалом, полностью предохранял собак от заражения D.immitis. M.Tagawa et al. (1985) определили оптимальную дозу и время проведения профилактической обработки мильбемицином Д собак в разные сроки после экспериментального заражения D.immitis. 100%-ный эффект получен при введении мильбемицина Д в форме желатиновых капсул орально в дозах 1,0-3,2 мг/кг на 1, 15, 30, 45 и 60-й дни после заражения. Эффект от применения мильбемицина Д на 75 и 90-й дни заражения снижался и составил 96,9%. При вскрытии подопытных собак через 6 месяцев после экспериментального заражения дирофилярий в их организме не обнаружили. Многократное применение мильбемицина оксима в дозе 0,5 мг/кг с интервалом в 1 мес., начиная с 60 дня после экспериментального заражения D.immitis, полностью предотвращало развитие дирофилярий в организме собак (R.B.Grieve et al., 1991).

W.L.Su (1996) считает наиболее легким, безопасным и эффективным в профилактике дирофиляриоза применение иммитицида (меларсомина дигидрохлорида) и ивермектина в дозе 50 мг/кг per os или 200 мг/кг подкожно.

Селамектин (стронгхольд) новый полусинтетический авермектин, получаемый путем ферментации нового штамма Streptomyces avermitilis, примененный накожно в дозе 3 и 6 мг/кг на 30 или 60-й дни после экспериментального заражения собак D.immitis, губительно действовал на развивающиеся стадии дирофилярий. При вскрытии животных через 140-199 дней после экспериментального заражения взрослых дирофилярий у собак не обнаруживали. У контрольных нелеченых животных находили, в среднем, по 18,7 экз. D.immitis (T.L.McTier et al., 2000). Аналогичные результаты получены M.G.Boy et al. (2000), J.W.McCall et al. (2001).

R.G.Clemence et al. (2000) испытали селамектин и ивермектин на разных группах собак в дозах соответственно 6 мг/кг накожно и 6 мкг/кг перорально раз в месяц с месячным интервалом в период с мая по ноябрь. Через 180 и 300 дней после первой дачи препаратов микрофилярии в крови не находили. Отрицательный результат получен и при использовании антигена.

C.Genchi et al. (2002) предлагают в эндемичных районах с целью профилактики дирофиляриоза, вызванного D.repens, применять селамектин в дозе 6 мг/кг один раз в месяц в период активности промежуточных хозяев. Ни у одной собаки, обработанной селамектином, патентной инвазии в дальнейшем не обнаружили.

А.И.Мазуркевич, С.В.Величко, Н.С.Василик (2002) испытали эффективность стронгхольда (селамектина) в дозе 6 мг/кг накожно на собаках, инвазированных D.repens. Активность препарата оценивали на 7, 14, 21 и 30-й дни после его применения путем исследования крови обработанных собак. Установлена 100%-ная эффективность стронгхольда против микрофилярии D.repens. Через 14, 21 и 31 день после его применения микрофилярии в крови не находили.

Моксидектин при подкожном введении в дозах 0,17 и 0,5 мг/кг предохранял собак от заражения дирофиляриями при их экспериментальном заражении D.immitis в течение 180 дней после дегельминтизации (J.B.Lok et al., 2001). C.Genchi et al. (2002) предлагают в целях профилактики дирофиляриоза применять моксидектин в инъекционной форме в течение 6 месяцев, т.е. в период активности промежуточных хозяев. По данным авторов такая стратегия обладает 100%-ной эффективностью в течение 1 года.

Ниже представлен арсенал средств, применяемых в ветеринарной практике для профилактики дирофиляриоза.

Антгельминтики для профилактики дирофиляриоза

Препарат Название (фирма) Форма выпуска Кратность
применения
Диэтилкарбама- Филарибитс Плюс Таблетки Ежедневно
зин + (Пфайзер)
оксибендазол

Ивермектин Хатгард (Мериал) Таблетки Ежемесячно
Хатгард (Мериал) Пастилки Ежемесячно
Ивермек (Пита Фарм) Раствор Ежемесячно
Абиктин Раствор Ежемесячно
(Агроветсер-вис)

Ивермектин + Хатгард Плюс Пастилки Ежемесячно
пирантел памоат (Мериал)
Иверхарт Плюс Пастилки Ежемесячно
(Вирбак)

Мильбемицин Интерцептор Таблетки Ежемесячно
оксим (Новартис)
Сентинел Таблетки Ежемесячно
(Новартис)

Моксидектин Прохарт Раствор Ежемесячно
(Форт Додж)
Прохарт 6 Раствор 2 раза в год

Селамектин Револушн Раствор Ежемесячно
(Пфайзер)


Оптимальная схема профилактики дирофиляриоза

Оптимальные схемы применения антгельминтиков зависят от биоэкологических и эпизоотологических особенностей заболевания, а также продолжительности антгельминтного действия препаратов. Учитывая то, что инвазированные дирофиляриями собаки в течение всего года являются источником инвазии и особую опасность представляют летом в период активности промежуточного хозяина - комаров, необходимо разорвать цикл развития паразита путем предотвращения микрофиляриемии в крови зараженных собак в летний период и недопущения заражения комаров, а также предотвращения возможности заражения собак и развития дирофилярий в их организме путем применения микрофилярицидных препаратов в весенне-летне-осенний период, т.е. в период лета кровососущих комаров.

J.W.McCall et al. (1994) предложили стратегическую и тактическую программы применения меларсомина гидрохлорида при дирофиляриозе собак, которые апробировали в 3 штатах США. Стратегическая программа предусматривает применение меларсомина 3 раза в год с интервалом 4 месяца, независимо от сезона активности комаров. Тактическая программа применения меларсомина включает 2 обработки с интервалом 4 месяца. Первый раз меларсомин применяют в середине периода активности комаров, т.е. в августе, второй - в конце периода активности промежуточных хозяев, т.е. в декабре. При этом меларсомин вводится внутримышечно в поясничную мышцу в дозе 2,2 мг/кг 2 раза с интервалом 3 часа. Авторы провели 3 опыта в штатах Джорджия, Флорида и Луизиана на 30 собаках в каждом штате. У собак до опыта в крови обнаруживали микрофилярий. В каждом штате собак разделяли на 6 групп по 5 голов в каждой. Собак четырех групп содержали с апреля вне помещений. Собаки двух групп (контрольная и леченая) находились вне помещений в течение 12 месяцев. Собаки леченой группы получали меларсомин через 4, 8 и 12 месяцев после начала опыта (стратегическая программа). Другой группе собак, содержащихся вне помещений в течение 8 месяцев, назначали меларсомин на 4 и 8-м месяце (тактическая программа). Индикаторами служили собаки трех групп, в том числе, находящиеся на воле в период с апреля до августа (1-я группа) и с декабря до апреля следующего года. После содержания собак в указанные периоды на воле их перевели в помещения и через 5 месяцев подвергли эвтаназии. У собак брали пробы крови через каждые 4-5 месяцев и исследовали на наличие микрофилярий. Применение меларсомина по стратегической программе показало 99%-ную эффективность. При вскрытии 15 леченых собак только у одной обнаружили одну самку D.immitis. 13 из 14 собак (93%) контрольной группы заразились дирофиляриями с интенсивностью инвазии 6,8; 5,4 и 25,2 экз. соответственно в штатах Джорджия, Флорида и Луизиана. Тактическая схема применения меларсомина показала 100%-ную эффективность.

Испытание предложенной авторами монографии схемы профилактики дирофиляриоза собак с применением ивермека проводили на 40 животных разного возраста, свободных от дирофилярий по результатам предварительных исследований проб крови '(И.А.Архипов, Д.Р.Архипова, 2002; Д.Р.Архипова, 2003).

Учитывая то, что персистентность действия ивермека составляет около 1,5 месяцев, нами испытана схема применения ивермека в весеннее-летне-осенний период с интервалом в 1,5 месяца. Первый раз ивермек вводили 20 собакам, свободным от инвазии подкожно в дозе 6 мкг/кг 17 апреля 2001 года, т.е. перед периодом начала активности комаров промежуточных хозяев дирофилярий. В последующем ивермек применяли в этой же дозе в течение всего периода активности комаров с интервалом 1,5 месяца и последний раз вводили препарат через месяц после окончания лета комаров. 20 собак препарат не получали и служили контролем. Пробы крови собак обеих групп исследовали на наличие микрофилярий спустя 8 месяцев после окончания лета комаров.

Результаты опыта свидетельствуют об отсутствии инвазированных животных в подопытной группе, получавшей препарат, т.е. животные не заразились. В контрольной группе в мае последующего года (2002 г.) в крови 2 из 20 собак обнаружили микрофилярий, что указывает на их заражение в летний период 2001 года.

Таким образом, применение ивермека в период активности комаров - промежуточных хозяев дирофилярий позволяет предотвратить заражение собак и дальнейшее распространение дирофиляриоза. Ивермек оказался эффективным средством для профилактики дирофиляриоза собак. Целесообразно применять его перед началом периода активности комаров, затем с интервалом в 1,5 месяца до окончания периода лета комаров и последний раз - спустя 1-1,5 месяца.

Мероприятия, направленные против дирофиляриоза собак, должны быть комплексными и включать борьбу с возбудителем дирофиляриоза путем применения препаратов с целью снижения микрофиляриемии у животных, борьбу с промежуточным хозяином для уменьшения их численности путем использования средств против личинок и взрослых комаров и защиту животных от нападения комаров с целью разрыва цикла развития дирофилярий обработкой собак инсектицидами и репеллентами.

Меры воздействия на источник инвазии включают применение микрофилярицидных препаратов ивермека, абиктина или других препаратов из группы макроциклических лактонов, меларсомина против взрослых дирофилярий, а также проведение преимагинальных дегельминтизаций ивермектинами.

Заключение

Результаты анализа литературных данных и наших исследований показали высокую зараженность собак дирофиляриями в условиях нашей страны.

По результатам исследований крови экстенсивность инвазии достигает у сельских собак до 32,0, а в среднем, равна 23,6% при обнаружении в 20 куб.мм крови 189,3-336,8 экз. микрофилярий (в среднем, 247,3±26,8 экз.) и у городских собак - 15,5% при обнаружении 112,7±11,4 экз. микрофилярий в 20 куб.мм.

При гельминтологическом вскрытии подкожной клетчатки собак установлена 29,3%-ная экстенсивность дирофиляриозной инвазии в сельской местности Калмыкии и 18,9%-ная - в городской при интенсивности инвазии, равной соответственно 15,1±2,4 и 8,2±1,6 экз.

О распространении дирофиляриоза собак в нашей стране сообщали многие исследователи, в том числе в Ростовской области (Б.М.Гурвич, 1929), г.Ростов-на-Дону (А.А.Артамонова, С.А.Нагорный, Н.А.Строкатов, 1997), Краснодарском крае (Б.Л.Гаркави, Ф.С.Михно, 2002), Саратовской области (А.В.Кудинов, Л.В.Анникова, 2002), Волгоградской области (М.В.Сухова, 2002). Результаты исследований авторов монографии дополняют сведения об ареале распространения заболевания с учетом плотности популяции D.repens у собак сельской и городской популяций.

Передача и распространение дирофиляриозной инвазии осуществляется с помощью промежуточных хозяев, которыми по данным различных авторов являются комары родов Aedes, Culex и Anopheles. Причем в разных регионах промежуточными хозяевами дирофилярий могут быть разные виды комаров. В условиях степной зоны юга России до сих пор не были установлены переносчики дирофилярий собак. Полученные нами результаты позволили выявить промежуточных хозяев D.repens, каковыми оказались комары Ae.caspius, Ae.dorsalis. He исключается возможность передачи этой инвазии и другими видами комаров: Cx.pipiens и An.maculipennis из-за высокой их зараженности личинками дирофилярий. По данным литературы роль промежуточного хозяина дирофилярий в разных природно-климатических зонах могут выполнять различные виды кровососущих комаров, а некоторые их виды могут служить переносчиками как D.repens, так и D.immitis.

Инвазионных личинок дирофилярий в организме комаров обнаруживали на 11-15-й дни после их питания на собаке, зараженной D.repens. Максимальное количество инвазионных личинок D.repens, независимо от дозы заражения, обнаруживали в головной части и мальпигиевых сосудах комаров.

Авторами монографии отмечено, что с повышением дозы заражения, т.е. концентрации микрофилярий в крови собак-прокормителей комаров значительно снижалось развитие инвазионных личинок в их организме из-за их большой концентрации в мальпигиевых сосудах, разрыва последних и гибели большого количества личинок. Так, в наших опытах при питании комаров Ae.caspius на собаках с концентрацией микрофилярий 150 экз. в 20 куб.мм крови смертность среди комаров составила 33,1%, а при концентрации 750 экз. смертность насекомых за 15 дней достигала 77,5% и при средней смертности 10,3% в случае питания кровью собак, свободных от инвазии. Причиной гибели личинок дирофилярий в организме комаров являются различные защитные механизмы насекомого: специальное глоточное устройство, наличие кристаллов оксигемоглобина, образующихся вследствие коагуляции крови в кишечнике комаров, лизис кутикулы личинок клетками комара, инкапсуляция и/или меланизация личинок в мальпигиевых сосудах и другие иммунные реакции хозяина, а также внешние факторы, такие как температурный режим и т.д.

Продолжительность препатентной стадии развития дирофилярий в организме собак также отличается по данным разных авторов, что обусловлено различными природно-климатическими условиями. Учитывая отсутствие данных о продолжительности развития дирофилярий в организме собак в условиях нашей страны, нами установлена продолжительность препатентной стадии развития D.immitis и D.repens в организме собак, равная соответственно 235 и 193 дням. Полученные нами результаты по срокам развития D.immitis в организме собак значительно отличаются от данных W.L.Newton (1957) и T.C.Orichel (1961) и практически соответствуют данным W.Webber, F.Hawking (1955).

Результаты исследований крови и гельминтологических вскрытий показали, что в максимальной степени инвазированы дирофиляриями (D.repens) собаки в возрасте 4-6 лет. Зараженность собак в возрасте до 1 года, 1-3, 4-6, 7-9 и старше 10 лет составила соответственно 0; 26,3; 33,3; 29,4 и 28,5%, что свидетельствует об отсутствии возрастного иммунитета у собак к заражению дирофиляриями.

При изучении количественных показателей инвазированности собак D.repens в разное время года по данным исследований крови нами установлены значительные колебания в экстенсинвазированности собак и количестве микрофилярий в периферической крови собак. Однако по результатам гельминтологических вскрытий собак инвазированность в разные сезоны года отличалась несущественно. На наш взгляд, такая разница обусловлена сезонной периодичностью микрофиляриемии.

Интенсивность дирофиляриозной инвазии у взрослых собак в течение года существенно не изменяется. Однако изменяется возрастная структура популяции D.repens в организме собак в разные сезоны года. Весной и летом у собак обнаруживали только взрослых дирофилярий, а осенью и зимой - неполовозрелых особей и взрослых в соотношении 1:3,6 осенью и 1:6,8 зимой. Наличие неполовозрелых дирофилярий в осеннее-зимний период обусловлено развитием дирофилярий новой генерации в результате заражения в летний период.

В литературе имеются противоречивые данные относительно влияния пола на зараженность дирофиляриями. Так, по данным S.A.Wright, K.W.Boyce (1989), J.A.Montoja et al. (1998) самцы больше заражены D.immitis, чем самки. Противоположного мнения придерживаются S.Gianneto et al. (1997), H.Y.Yoon et al. (2002). По результатам исследований авторов монографии пол не оказывает существенного влияния на зараженность собак дирофиляриями, что согласуется с данными S.Bokaie et al. (1998), B.H.Fang et al. (1999) и S.H.Wee (2001).

Данные литературы относительно влияния породы на зараженность собак дирофиляриями также расходятся. В опытах авторов монографии не получено значительной разницы в инвазированности собак разных пород D.repens, тем не менее в большей степени были инвазированы немецкие и кавказские овчарки.
В большей степени на зараженность собак дирофиляриями оказывают такие факторы, как условия содержания, характер использования собак. В максимальной степени были инвазированы дирофиляриями бродячие и приотарные собаки и в меньшей - квартирные, что связано с тем, что такие собаки имеют меньшую возможность контакта с промежуточным хозяином. T.Oda et al. (1996) также отмечали слабую зараженность комнатных собак дирофиляриями.

Дирофилярии оказывают патогенное действие на организм собак, о чем свидетельствуют литературные источники (K.Ishihara et al., 1978; R.B. Atwell, I.B.Buoro, 1983 и др.). Результаты опытов авторов монографии показали, что наиболее патогенными являются дирофилярий вида D.immitis, которые вызывают снижение количества эритроцитов, гемоглобина, СОЭ, нейтрофилов и повышение количества лимфоцитов и эозинофилов. Изменения в крови собак, инвазированных D.repens, были менее выраженными.

В биохимических показателях крови собак изменения были более существенными также при дирофиляриозе, вызванном D.immitis. Аналогичного мнения придерживаются M.C.Sharma, S.P.Pachauri (1982), M.Sahal et al. (1997) и другие исследователи.

До сих пор практические специалисты испытывают затруднения при постановке диагноза из-за незнания суточной и сезонной периодичности микрофиляриемии у собак. В связи с этим, авторами монографии проведены специальные опыты и установлено, что максимальное количество микрофилярий в крови собак, инвазированных D.immitis, отмечается вечером, а при дирофиляриозе, вызванном D.repens, микрофиляриемия в максимальной степени проявляется ночью. Следовательно, для установления диагноза при дирофиляриозе пробы крови для исследований целесообразно брать в вечерне-ночное время. Суточную периодичность при дирофиляриозе, вызванном D.immitis, отмечали также J.K.Rhee, S.S.Yang, H.C.Kim (1998), B.Meshgi et al. (2001).

Численность микрофилярий D.repens и D.immitis также изменяется в разные сезоны года. Пик микрофиляриемии по данным авторов монографии отмечается летом в период максимальной активности и численности комаров - промежуточных хозяев, что позволяет осуществить передачу и дальнейшее распространение дирофиляриоза.

Наличие диапаузы в микрофиляриемии собак при дирофиляриозе создает трудности для диагностики заболевания. В связи с этим авторами монографии для провокации микрофиляриемии в крови собак предложено применять за 30-60 минут до взятия крови дексаметазон, который позволяет значительно повысить количество микрофилярий в крови и, тем самым, более эффективно устанавливать диагноз, особенно при слабой интенсивности инвазии и в период суточной или сезонной диапаузы.

Для прижизненной диагностики дирофиляриоза собак предложено много методов, в том числе, нативного мазка, метод Knott и его модификации, метод фильтрации и др. (M.Martini et al., 1991). Однако они не позволяют оценить количественные показатели микрофиляриемии. В связи с этим авторами монографии предложено использовать меланжер для подсчета количества лейкоцитов и счетную камеру Фукс-Розенталя для учета количества микрофилярий в определенном объеме камеры. Предложенный метод позволяет более быстро провести учет количества микрофилярий в 20 куб.мм крови. Метод испытан на 94 собаках в 3 населенных пунктах в сравнении с модифицированным методом Knott и показал высокую эффективность. Он может быть применен для оценки эффективности препаратов, изучения эпизоотологии заболевания, плодовитости дирофилярий и других целей.

Изучение биоэкологических и эпизоотологических особенностей дирофиляриоза позволило обоснованно разработать оптимальную схему профилактики этого заболевания собак на основе применения ивермека или абиктина в летний период, т.е. в период активности комаров промежуточных хозяев дирофилярий. Была поставлена цель - разорвать цикл развития дирофилярий путем предотвращения микрофиляриемии в крови зараженных собак в летний период и недопущения заражения комаров, а также предотвращения возможности заражения собак и развития дирофилярий в их организме путем применения микрофилярицидных препаратов летом в период лета комаров. Испытаны отечественные препараты ивермек и абиктин и изучена их персистентность действия против микрофилярий в дозе 0,006 мг/кг, ранее установленной для других ивермектинов (A.J.Paul et al., 1986; I.Ohishi et al., 1987 и др.). Персистентность действия против микрофилярий D.repens ивермека составила 45, абиктина - 40 дней. С учетом полученных результатов предложена и испытана схема профилактики дирофиляриоза собак на основе применения ивермека в летний период с интервалом 45 дней, позволившая предотвратить заражение собак и дальнейшее распространение дирофиляриоза. Мероприятия против дирофиляриоза собак должны быть комплексными и направлены на уничтожение возбудителя путем применения макро- и микрофилярицидных препаратов, борьбу с промежуточным хозяином и защиту животных от нападения комаров.

 Отправлено: 20.03.07 14:00. Заголовок: Re:

материалы взяты с сайта www.sobachnik.org . У моего кобеля тоже в 8 мес. нашли микрофилярии. Вет сказал, что равновероятно это могло быть внутриутробное заражение или комары (у нас Волга, комаров много). Лечили: ивермектин - 3 инъекции с интервалом в неделю + Диронет (антигельминтик широкого спектра, в качестве профилактики применяется) + Карсил (т.к. ивермектин довольно токсичен). Сердечные не давали, не нужно было. Успешно вылечили, тьфу-тьфу-тфьу. Да и достаточно легко болезнь протекала, была только сильная утомляемость и "капризный" аппетит. Точно после 6 дней (как по книжке) состояние резко улучшилось, собаку как подменили, стал такой же активный, жизнерадостный. Даже умудрились выиграть в щенках на моно. После лечения еще 2-жды проверяли кровь, все чисто. Теперь нужно раз в полтора месяца кровь проверять, с весны до поздней осени, т.к. комары. Обработка: Фронтлайн, через 2 недели Адвантикс, через 2 недели Фронтлайн, и так до поздней осени. Фронтлайн не "держит" комаров, а Адвантикс не "держит" клещей. Так и чередую.

 Отправлено: 20.03.07 14:21. Заголовок: Re:

Delenn Вот спасибо! Прям сейчас распечатаю и вету в подарок. для развития)))

 Отправлено: 20.03.07 20:08. Заголовок: Re:

Delenn
Я тоже с Волги,очень эффективен Хартс.Капается на 3 недели.Он от клеща,комара.Продаётся в пипетках на разную весовую категорию.

 Отправлено: 21.03.07 13:29. Заголовок: Re:

с 5 моих знакомых собак (совершенно разных, живущих в разных условиях, в разных районах), обработанных Хартс'ом, снимали живых клещей, насосавшихся и не собиравшихся умирать. Насчет эффективности от комаров - не знаю.

 Отправлено: 21.03.07 14:05. Заголовок: Re:

Delenn Мы с Догги, пока жили в Москве, обрабатывали шерсть Хартсом и ошейник тоже Хартс купили. Клещей не видела, хотя осматривала регулярно, ведь гуляли в парке каждый день. Срочно напишите список, плиииз, всех препаратов от клещей + комаров. А я тему для голосования открою! Итак: Эдвантикс, Хартс, Фронтлайн... Что еще?

 Отправлено: 21.03.07 14:37. Заголовок: Re:

Еще Бутокс (лучше неразбавленный, в больших бутылках) - от клещей, но в пользовании неудобный, пользовалась им лет 7 назад. Кажется, его надо было разводить в 2-х или 3-х литрах воды и обрызгивать собаку. Но точно не помню, давно не пользуюсь. Хорош от клещей отечественный Барс, от комаров - не знаю. А Фронтлайн лучше французского производства, чем польского. В дополнение к Фронтлайну и Эдвантиксу пользуюсь ошейником Килтикс (у некоторых собак может быть на него аллергия). Ошейник Beaphar, на мой взгляд, не очень надежен. Мой предыдущий кобель заболел пироплазмозом через 5 недель после обработки Бутоксом и нося ошейник Beaphar. Хотя сочетание Барс + ошейник Beaphar для соседских собак оказалось эффективным.
Но вообще, судя по разным форумам и статьям, эффективность даже одного и того же препарата разная. Может, зависит от местности, или от партии товара, не знаю.

 Отправлено: 21.03.07 17:31. Заголовок: Re:

У меня вот счас мысль возникла. Сколько собак умирает от сердечной недастаточности. это же один из самых распространеных диагнозов. И не всем делают вскрытие. Может у них дирофиляриоз? комарики то всех кусают. Деленн, очень интерестная статья! Я скопировала, спасибо. Только теперь нужно думать как же уберечся от этой напасти(((((

 Отправлено: 21.03.07 23:32. Заголовок: Re:

Насколько я знаю ни Барс ни Фронтлайн от комаров не эффективен. Эдвантикс да.

Главное чтобы препараты были не "паленые". Точно не паленый Барс, смысла нет подделывать, потому как дешевый. Остальные все подделываются

 Отправлено: 23.03.07 19:16. Заголовок: Re:

Kukushechka пишет:

цитата:

Главное чтобы препараты были не "паленые".

Вопрос? как уберечься от подобной покупки? Чем отличается паленый от нормального? Есть ли в Москве проверенные фирмы, где можно заказать эдвантикс или стронгхолд? У нас нет этих препаратов.

 Отправлено: 26.03.07 10:54. Заголовок: Re:

только не в интернет-магазине Гав'c!!! И заказ не доставят, и деньги не вернут.